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QuickID 目标图像采集

QuickID 目标采集

 

QuickID 目标采集的工作原理是在低放大倍率下采集样本的整个视野 (FoV),通过快速图像分析过程发现目标物体或罕见事件,随后在高放大倍率下使用可能包含相关波长、Z -stack和时间点的用户配置实验步骤,仅重新采集这些孔或位置。

目标图像采集由 MetaXpress 软件进行,并可以与 ImageXpress Micro 4 宽场高内涵和 ImageXpress Micro Confocal共聚焦高内涵系统一起使用

QuickID 目标

 

使用 QuickID 目标采集提高成像效率

 

如果研究人员需要在高分辨率、多种波长的情况下,在一系列 Z 平面上对样本进行成像,那么进行基于图像的高内涵筛选的研究人员可能会面临多个技术难题。此类实验的采集时间通常很长(几小时到几天),对图像存储空间的需求很大 (100 GB),并且需要较高的计算能力来管理图像分析时间(时间越短越好)。

为最大限度地解决这些难题,可采用一个简单的方法,即仅采集含有目标物体的载玻片或微孔板的视野。当目标物体在每份样本中都很少、随机分布于空间中或仅在某些微孔中较罕见地出现时,此技术可能特别有用。与我们的高内涵成像系统和图像分析软件一起使用时,该解决方案可显著缩短生成结果的时间并降低图像存储需求。

 

以快 10 倍的速度从 3D 细胞培养物中采集数据

在应用说明“以快 10 倍的速度从使用 Symphony® 和 VersaGel® 培养的 3D 细胞球中采集数据”中,使用一种轻质可交联水凝胶作为基质,以在一个 3 D空间中每孔培养 1-4 个细胞球。染色后,使用 2x 物镜进行 QuickID,以在一个视野中捕获整个孔。发现目标物体后,自动引用它们的 X 和 Y 坐标,以便 ImageXpress Micro 系统可在多个 Z 平面中于 10x 放大倍率、3 个波长下仅获取相关图像。凭借 QuickID,采集速度比在高放大倍率下对每个孔中的所有位置进行成像快 10 倍,这也将所需的存储空间减少了 20 倍。

 

3D 细胞培养物

 

QuickID 用于简化细胞球图像的采集。在低放大倍率下采集的图像可在一个视野中查看整个孔,使用该图像来确定物体,以便在多个 Z 平面中,于更高的放大倍率下使用 3 个波长进行自动重新成像。

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在视野 (FoV) 中央自动成像 3D 细胞球

培养细胞球用于筛选抗肿瘤药物的方法有多种。在某些形式下,细胞球并不总是位于孔的中央,这可能让人难以在高放大倍率下于单个视野 (FOV) 中采集目标物体。QuickID 让我们能够使用 20x 水浸物镜,对视野中央的每个细胞球进行自动成像,以采集多个波长下的 Z 堆栈,而无需在其他位置进行采集。

QuickID 目标

使用 10x 物镜进行 QuickID,以迅速成像整个微孔板。随后确定细胞球物体,并使用其 X、Y 坐标以 20x 水浸物镜,在多个波长下和多个 Z 平面中,自动仅采集包含肿瘤微组织的位置。进行图像分析以发现和测定 3D 体积内的物体。

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适用于目标采集的其他应用

QuickID 简化了流程,以便仅采集相关图像,从而节省大量时间并降低了存储需求。使用 QuickID方法对其他应用领域示例包括分裂细胞或模型生物体的实时成像,以及玻片上组织切片的特定区域的成像junjuyou均具有明显优势和益处。

 

  • 有丝分裂纺锤体

    有丝分裂纺锤体

    在正常细胞群中,仅约 1-5% 的细胞处于有丝分裂状态。目标采集可用于在整个细胞群中发现这些细胞,然后以高放大倍率随时间推移对其进行跟踪。如果单细胞在采集时间过程中移出区域,则可以对其进行追踪和重新居中。

    3D 微细胞球

    3D 微细胞球

    微细胞球通常聚集在平底板的边缘。可以首先进行透射光采集,然后再对产生荧光的细胞进行目标 Z -stack采集,以大大减少所需的图像数量。

  • 脑切片中的海马体

    脑切片中的海马体

    根据样本的形态及其制备,海马体和大脑的其他部分可能会落在玻片上的各个区域。可在多个波长下进行目标 Z 堆栈采集,以研究共定位。

    斑马鱼的心跳

    斑马鱼的心跳

    斑马鱼在孔中的位置和方向可发生变化。可以使用目标采集对心脏、眼部、大脑、卵黄囊、虹细胞或血管进行高放大倍率 Z -stack或延时采集。

  • 微核

    微核

    在低放大倍率下,很难准确确定物体为真正的微核还是仅为伪影。高放大倍率下的目标重新采集可帮助减少假阳性数量。

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