什么是发光?

发光是由化学反应(化学发光)或酶反应(生物发光)引起的某种物质的光发射。

发光概述(左侧)

从光学上来说,发光检测较荧光检测简单,因为它不需要光源或特定的激发光学器件。

发光概述(右侧)

图 1 - 闪光和辉光反应

发光可以是一种“闪光”或“辉光”反应,这取决于其动力学特征。闪光发光会在短时间(通常是几秒)内发出非常明亮的信号。辉光发光发射的信号更加稳定,但通常较弱,可持续几分钟或几小时。闪光发光通常需要有注射器加样系统,在测量前使用注射器将底物加入到反应体系中,这样就不会错过信号收集。通常建议使用白色微孔板做发光实验,因为它们能反射光,使信号最大化(见图 1)。

发光的优点

与光吸收和荧光相比,发光是一个适合许多应用的极其普遍的检测平台。它通常有较宽的动态范围和较高的灵敏度,因为背景干扰(化合物、媒介和细胞的自发荧光)较低。此外,发光测定常常是均相的(无清洗步骤),因此在高通量应用中能更简单地进行自动化操作。

 

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