什么是荧光?
荧光是一些原子和分子吸收特定波长的光(激发:Ex),随后短暂发射 (Em) 更长波长的光的特性(图 2)。激发和发射峰之间的距离称为斯托克斯 (Stokes) 位移,该位移取决于荧光基团(图 1)。
荧光利用一个外部光源,在特定波长下激发样品。荧光基团受到适当波长的激发,分子从基态转化成激发态。随着分子回到基态,能量会以热(损失能量)和能量更低、波长更长的光的形式释放(图 3)。
图 1
图 2
图 3
如何进行荧光检测?
具备荧光强度 (FI) 检测模式的微孔板读板机使用一种光源(通常是氙闪灯或 LED),来激发特定波长的荧光基团(荧光分子)。可以使用一个特定波长的滤光片或可连续调节波长的单色器,来选择激发样品所需的波长。
荧光基团随后会释放出一个不同波长的发射光,经由另一个滤光片或单色器进入检测器 PMT。光电倍增管 (PMT) 可以检测这种发射的荧光,样品的荧光强度用相对荧光强度单位(RFU)表示。
荧光概述
-
荧光计、荧光分光光度计和荧光微孔板读板机
用来测量样品荧光的仪器有很多种名称:荧光计、分光荧光计、荧光分光光度计、荧光分光计、荧光光度计等。
总的来说,它们都使用光源在某种波长下激发样品,并在另一种波长下测量发射的荧光。样品可以装在许多容器中,包括比色皿、小试管和培养皿。“荧光微孔板读板机”是指一种能测量微孔板(通常是 96 孔或 384 孔板)中样品荧光的仪器。微孔板有更高的通量,可用于筛选或其它多样品分析的应用。
什么是双光栅荧光系统?
一些荧光微孔板读板机使用双光栅代替滤光片,来选择激发样品的光的波长以及样品发射波长。这种单色器使用衍射光栅从空间上分离光的颜色,而且可以选择各种波长,无需为所需的每种波长安装单独的滤光片。
我们的 SpectraMax Gemini 双光栅荧光微孔板读板机使用两个扫描光栅,来选择理想的激发和发射波长。
-
钙流检测 (GPCR)
监测下游钙或环腺苷酸 (cAMP) 可评估通过 G 蛋白偶联受体 (GPCR) 的细胞信号传导。对于 Gq 蛋白偶联受体激活后的钙流,通常在荧光微孔板读板机上使用钙敏感染料对活细胞进行实时监测。
以下是一些您可能感兴趣的关于钙测定 (GPCR) 的应用说明:
cAMP 检测 (GPCR)
监测腺苷酸环化酶激活产生的第二信使 cAMP 水平,是筛选 Gi/Gs 蛋白偶联受体的激动剂和拮抗剂最常用的一种方法。可使用结合 cAMP 的荧光分子监测 cAMP 水平,这种分子使用荧光微孔板读板机即可检测。
以下是一些您可能感兴趣的关于 cAMP 测定 (GPCR) 的应用说明:
-
Caspase-3 凋亡检测
凋亡是一个高度受调节的细胞程序,会导致胚胎发育等正常过程中的细胞凋亡,以及癌症和神经退行性疾病等疾病过程中出现细胞死亡。可使用各种成像或微孔板读板机检测系统进行凋亡检测,提供有关正常或疾病相关细胞死亡机制的重要信息。
了解专门适用于微孔板读板机的 Caspase-3 单步骤、均相检测。
细胞增殖检测
使用荧光检测来定量细胞增殖,可让研究人员轻松监测药物和其它实验处理方法对细胞生长的影响。
此应用说明描述了细胞增殖的两种检测方法。首先,使用细胞标准曲线对细胞增殖进行定量。其次,使用经过 RNase 处理的细胞样品和 DNA 标准曲线对细胞增殖进行定量。
-
细胞毒性检测
开发适用于安全性和疗效检测的预测性体外测定法,有利于改善药物开发工艺并减少药物消耗。在药物开发早期,将干细胞用作筛选化合物的工具引起了人们的极大兴趣。
在这篇科学文章中,我们描述了一种使用干细胞源性细胞模型以高通量的方式对各种化合物进行毒性评估时,多功能微孔板读板机获得的结果。
EarlyTox 心脏毒性检测
干细胞源性人心肌细胞的表型特征和电生理学特征与天然人心肌细胞相似。培养的心肌细胞能形成一个搏动的合胞体,该合胞体的活动与天然心肌细胞相似。随细胞同步收缩而发生的胞内钙振荡水平可使用钙敏感染料进行监测,处理诱发的振荡模式变化可通过一段时间后的荧光信号变化进行监测。
以下是您可能感兴趣的应用说明:
-
EarlyTox 细胞活性检测试剂盒
从研究细胞死亡机制到开发针对疾病中的细胞凋亡的新治疗方法,细胞活性检测对于许多研究领域而言都至关重要。使用荧光微孔板读板机(酶标仪)是最常见的细胞活性检测手段之一。
以下是一些您可能感兴趣的应用说明:
荧光蛋白定量
真核细胞内的蛋白质处于一种动态平衡状态,在合成和降解之间存在高度调节的平衡。经过数十年的研究,人们已经充分了解蛋白合成,但仅在过去二十年,我们对蛋白降解的认识才取得了很大的进步。
在我们的应用说明中了解更多荧光蛋白的信息:
-
纳米微粒分析
纳米技术是一个迅速发展的领域,由于在生物化学研究中的潜在应用,它已引起科学界的关注。
目前,鉴定纳米粒子及其分子相互作用的技术数量有限。在这里,我们描述了一种可以证实纳米粒子和表面覆盖分子之间相互作用的光谱特征分析方法。
神经元钙流
监测胞内钙变化是一种极其有用的技术,可用于研究钙离子对神经元的不同作用。直接测量神经元网络中的动态钙流,可以揭示神经元如何处理细胞外间隙的信号。
此应用说明表明,使用荧光微孔板读板机能够检测原代大鼠皮层神经元中的胞内钙流:
-
核酸定量
DNA 定量是分子生物学研究领域中的重要步骤,需要更高的准确性、可靠性并减少样品使用量(如高通量测序)。相比分光光度法进行 DNA 定量,荧光法具有更多优势,如显著提高的灵敏度,与单链 DNA (ssDNA) 或 RNA 相比,对双链 DNA (dsDNA) 的高度选择性,以及更高的污染物耐受性(蛋白质和碳水化合物)。
以下是一些您可能感兴趣的关于核酸定量的应用说明:
色氨酸检测
蛋白发出内源荧光是由于存在芳香族氨基酸色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸。色氨酸可控制蛋白的释放,对溶剂极性和局部环境最为敏感。分析色氨酸荧光的变化情况可得出蛋白质变性和构象方面的信息。
在这些应用说明中,我们展示了 SpectraMax® 多功能微孔板读板机用于测定各种固有色氨酸荧光检测时的性能。
前沿资源
荧光资源
科学海报
Automated workflow for screening of CRISPR-edited cell lines. High throughput screening and analysis of monoclonality.
用于筛选 CRISPR 编辑细胞系的自动化工作流程。高通量筛选和单克隆性分析。
基因编辑使我们能够使用多种工具通过缺失、添加或其他修饰来操控脱氧核糖核酸 (DNA)。有许多有效的策略可进行这些修饰……
文献
The Best Microplate Readers According to our Product Reviewers
我们的产品评论员表示,这是绝佳的微孔板读板机
Biocompare 表示:“在所有实验室中,最容易被忽视的其中一种设备就是微孔板读板机。虽然它们在根据各种……生成数据方面发挥着重要作用
应用文章
Sensitive RNA fluorescent quantitation with the Quant-iT RiboGreen RNA assay kit
使用 Quant-iT RiboGreen RNA 检测试剂盒进行灵敏的核糖核酸 (RNA) 荧光定量
核酸浓度的准确定量对于转染、克隆、PCR 和下一代测序 (NGS) 等下游应用而言至关重要。通常,这些……
应用文章
Spectral Fusion™ Illumination technology for an extended dynamic range on the SpectraMax i3x Multi-Mode Microplate Reader
在 SpectraMax i3x 多功能微孔板读板机上使用 Spectral Fusion™ 照明技术可扩展动态范围
许多微孔板读板机和分光光度计均使用光电倍增管 (PMT) 来检测荧光和发光信号。PMT 的工作原理是首先检测来自……的光子
科学海报
Evaluation of a fluorescent approach to implement monoclonality assurance using calcein-AM viability dye
评估一种使用钙黄绿素-乙酰氧基甲酯 (AM) 活性染料保证单克隆性的荧光方法
评估单克隆性是确定细胞系的关键,并且监管机构要求,提供单克隆性证据后才能让药物上市。
应用文章
Rapidly assess drug response in 2D and 3D breast cancer model systems with a luminescent viability assay
通过发光活性测定快速评估 2D 和 3D 乳腺癌模型系统的药物反应
多年来,涉及在平坦培养表面上以单层培养细胞的二维 (2D) 细胞培养已成为一种用于研究疾病机制……的便捷系统
电子书
How to Implement Colony Picking Workflows with Automation
如何实施自动化克隆拣选工作流程
克隆拣选技术是哺乳动物细胞系开发和微生物学研究工作流程中的一个强大工具。
电子书
Virology and Vaccine Research Microplate Reader Solutions
病毒学和疫苗研究微孔板读板机解决方案
我们明白,对于正在努力加速进行检测、使药物尽快推向市场以及致力于支持……的人来说,这是一个多么具有挑战性的时刻
电子书
The Ultimate Guide to Microplate Reader Solutions
微孔板读板机解决方案的最终指南
评价微孔板读板机的优劣并不复杂,首先,请考虑您的应用需求。如果预算有限,符合您目前主要应用的单功能读板机......
博客
FDA 21 CFR Part 11 and the importance of regulatory compliance in GMP and GLP labs
FDA 21 CFR 第 11 部分和监管合规性在 GMP 和 GLP 实验室中的重要性
《美国联邦法规》在标题 21 下所述的食品和药品法规以及欧盟的 EudraLex 附件 11 对于确保安全......至关重要
应用文章
Sensitive fluorescent quantitation of DNA with the Quant-iT PicoGreen dsDNA Assay Kit
使用 Quant-iT PicoGreen dsDNA 检测试剂盒对 DNA 进行灵敏的荧光定量
通常,可使用微孔板读板机(酶标仪)通过测定 DNA 溶液在 260 nm 处的吸光度定量双链 DNA。然而,该方法仅能够测定低至大约......
文献
Multiple Steps from Microplate-Reader Workstations
微孔板读板机工作站的多个步骤
科学家可采用多种方法来克服工作流程中的瓶颈。例如,一个包含微孔板读板机的工作站可处理多个步骤,以此提高效率并增加……
文献
Advanced Cell Screening and Imaging Reveals How the Cardiac System Responds in Drug Development
先进的细胞筛选和成像可揭示心脏系统在药物开发中的反应
在药物发现方面,有了时间和金钱投资,通过临床前阶段的测试、分析和评价显著增加了候选药物的进一步进展。通过排除……
文献
From 3D high throughput to simple automated imaging: Cellular imaging within reach of every laboratory
从 3D 高通量到简单的自动化成像:让每个实验室都可以进行细胞成像
自 Galileo Galilei 和 Antonie van Leeuwenhoek 开创时代以来,我们对细胞进行成像的能力已取得了长足的进步。现在我们可提供多种成像技术,从简单……
文献
Everything you need to know about the ImageXpress Pico Automated Cell Imaging System
您需要了解的有关 ImageXpress Pico 自动化细胞成像系统的所有信息
根据您的应用以及您研究的具体内容,我们可提供多种成像技术,包括共聚焦显微镜、电子显微镜等……
文献
Molecular Devices introduces enterprise-level SoftMax Pro 7.1 GxP Software
Molecular Devices 推出了企业级 SoftMax Pro 7.1 GxP 软件
基于当前业内领先的数据采集和分析软件,SoftMax Pro 7.1 GxP 软件可扩展其系统审计追踪功能,包括日期和时间戳;使……
应用文章
Calcium flux assay for in vitro neurotoxicity studies and drug screening
适用于体外神经毒性研究和药物筛选的钙离子通道检测
钙成像或监测细胞内钙离子的变化是一种极其有用的技术,适用于研究钙离子在作用于神经元方面起到的不同作用…...
应用文章
Measure intrinsic tryptophan fluorescence on the SpectraMax iD3 microplate reader
在 SpectraMax iD3 微孔板读板机上检测色氨酸的内源性荧光
蛋白发出内源荧光是由于存在芳香族氨基酸色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸。色氨酸的激发波长最长约 270-280 nm 且有…...
应用文章
Measuring cell health on the SpectraMax iD3 reader with cell viability assays
使用细胞活性测定法在 SpectraMax iD3 微孔板读扳机上检测细胞健康状态
从活性和凋亡通路的多个有利位置检测细胞健康情况可洞察各种实验处理方法对细胞产生的影响,包括药物…...
应用文章
Intrinsic tryptophan detection with the SpectraMax i3 Multi-Mode Microplate Platform
使用 SpectraMax i3 多功能微孔板读板机进行色氨酸测定
蛋白发出内源荧光是由于存在芳香族氨基酸色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸。色氨酸的激发波长最长约 270-280 nm 且有…...
应用文章
Complete cAMP workflow solution using the CatchPoint cAMP Fluorescent Assay Kit
使用 CatchPoint cAMP 荧光检测试剂盒完成 cAMP 工作流程解决方案
G 蛋白偶联受体 (GPCR) 是重要的跨膜蛋白,可将细胞外信号转化为细胞内应答。这些细胞内应答包括…...
应用文章
Using the NanoOrange Protein Kit with SpectraMax Microplate Readers
将 NanoOrange 蛋白试剂盒与 SpectraMax 微孔板读板机(酶标仪)配套使用
本应用说明介绍了如何在带有荧光检测模式的 SpectraMax® 微孔板读板机(酶标仪)中使用 Life Technologies 的 NanoOrange® 蛋白定量试剂盒…...
应用文章
Multiparametric assays for cardiomyocytes on a single platform
在一个平台上对心肌细胞进行多参数测定
最近的研究证明,与心肌细胞收缩有关的细胞内钙离子通道变化可在具有荧光成像功能的微孔板读板机(酶标仪) (FLIPR Tetra…...
应用文章
EarlyTox Glutathione Assay Kit on SpectraMax Fluorescence Microplate Readers
使用EarlyTox 谷胱甘肽检测试剂盒在 SpectraMax 荧光微孔板读板机(酶标仪)上进行检测
凋亡是一个高度调节的细胞程序,可导致胚胎发育等正常过程以及包括癌症和神经退行性病变在内的疾病过程中的细胞死亡…...
应用文章
EarlyTox Live/Dead Assay Kit on SpectraMax Fluorescence Microplate Readers
使用 EarlyTox 活/死细胞检测试剂盒在 SpectraMax 荧光微孔板读板机(酶标仪)上进行检测
细胞活性检测通常用于评估包括候选药物、通路激活因子和抑制因子以及报告基因在内的各种治疗的效果。其中一个…...
应用文章
Optimization of a muscarinic M3-receptor assay using frozen CHO cells on the FlexStation 3 reader
在 FlexStation 3 微孔板读板机(酶标仪)上使用冷冻CHO细胞优化毒蕈碱型 M3 受体检测
细胞检测通常比较困难而且费时。为了加快和简化这个复杂的过程,冷冻细胞(可在未预先培养的情况下检测)…...
应用文章
Calcium signaling with FLIPR Calcium 6 and 6-QF Assay Kits on the FlexStation 3 reader
在 FlexStation 3 微孔板读板机(酶标仪)上使用 FLIPR 钙 6 和 6-QF 检测试剂盒检测钙信号
Molecular Devices 的 FLIPR® 钙流检测试剂盒采用灵敏的钙指示剂和专有的掩蔽染料,使研究人员能够开展高敏感性荧光筛选…...
应用文章
Quantitation of dsDNA samples using the SpectraMax Quant dsDNA Assay Kits
使用 SpectraMax Quant dsDNA 检测试剂盒进行微量 dsDNA 定量分析
由于不同类型的测试样品可能含有不同浓度的 DNA,因此选择具备所需灵敏度和检测范围的合适荧光试剂是…...
应用文章
Measuring cell proliferation using the CyQUANT Cell Proliferation Assay with SpectraMax Microplate Readers
使用 CyQUANT 细胞增殖检测试剂盒和 SpectraMax 微孔板读板机(酶标仪)测定细胞增殖
使用荧光检测来定量细胞增殖,可让研究人员轻松监测药物和其它实验处理方法对细胞生长的影响。CyQUANT 细胞增殖…...
应用文章
HTRF cAMP HiRange Assay on SpectraMax Multi-Mode Microplate Readers
在 SpectraMax 多功能微孔板读板机(酶标仪)上进行 HTRF 法的 cAMP HiRange 测定
HTRF 是由 Cisbio Bioassays 开发的一种通用技术,适用于检测生物分子相互作用。它结合了荧光共振能量转移 (FRET) 技术和时间…...
应用文章
Spectral signature analysis of surface functionalized nanoparticles
对表面功能化的纳米微粒进行光谱特征分析
纳米技术是一个迅速发展的领域,由于在生物化学研究中的潜在应用,它已引起科学界的关注。目前,有…...
应用文章
Monitoring Gq protein-coupled receptor activation on the SpectraMax i3x reader with injector module
在配有注射器卡盒的 SpectraMax i3x 微孔板读板机(酶标仪)上监测 Gq 蛋白偶联受体活化过程
通常使用具有荧光检测功能的微孔板读板机(酶标仪)利用钙敏感染料在活细胞中实时监测 Gq 蛋白偶联受体活化。自动处理液体(在…...
应用文章
EarlyTox Caspase-3/7 R110 Assay Kit on SpectraMax Fluorescence Microplate Readers
使用EarlyTox Caspase-3/7 R110 检测试剂盒在 SpectraMax 荧光微孔板读板机(酶标仪)上进行检测
凋亡是一个高度调节的细胞程序,可导致胚胎发育等正常过程以及包括癌症和神经退行性病变在内的疾病过程中的细胞死亡…...
科学海报
High Throughput Cell Based Assays for Toxicity Assessment using SpectraMax® Paradigm Plate Reader
使用 SpectraMax® Paradigm 微孔板读板机(酶标仪)进行高通量细胞测定以评估细胞毒性。
应用说明介绍了 SpectraMax Paradigm微孔板读板机 (酶标仪)读取类型和 ImageXpress Micro 成像系统之间检测性能的比较。
科学海报
Measurement of Proteosome Inhibition in Live Cells on the Analyst® GT, FLEXstation® and Gemini EM Microplate Readers Using the BD Biosciences Proteasome Sensor
使用 BD 生物科学蛋白酶体传感器在 Analyst® GT、FLEXstation® 和 Gemini EM 微孔板读板机(酶标仪)上测定活细胞中的蛋白酶抑制情况
蛋白酶体是一种存在于所有真核细胞(以及某些细菌)内的巨型蛋白复合体,可通过将无用蛋白分解成短肽来将其消除。它包含一个…...
文献
Multiparameter In Vitro Assessment of Compound Effects on Cardiomyocyte Physiology Using iPSC Cells
使用 iPSC 细胞对心肌细胞生理学的化合物效应进行多参数体外评估
大部分药物由于具有心脏毒性而未能通过临床研究;因此,开发能够评价对心肌细胞的潜在不良影响的灵敏体外测定法……
视频和网络研讨会

如何通过实验室自动化解决方案从耗时的流程转变为高效的工作流程

DispenCell 解决方案

DispenCell 单细胞分配器简介

DispenCell 细胞样品制备教程

DispenCell 吸头安装

使用钙黄绿素-AM 活性染料确保单克隆性
用于单克隆验证的紧凑、高速、强大的成像系统

通过 SpectraMax Mini仪器获得更多助力