QBT 脂肪酸摄取检测试剂盒
放射性监测脂肪酸摄入的常规方法通常需要细胞裂解且在非常低的温度下进行实验，造成了整体实验成本高昂、效率低且不适合于高通量筛选。其他基于荧光的实验方案通常需要使用低通量流式细胞仪 (FACS) ， 或需要进行细胞冲洗，而这些措施可能严重损害检测中使用的脆弱的脂肪细胞的完整性。
QBT 脂肪酸摄取检测试剂盒采用了 BODIPY® 正十二烷酸荧光脂肪酸类似物，以及我们的专利淬灭技术。BODIPY标记物作为理想的长链脂肪酸类似物，其作用类似于自然合成的脂肪酸，可作为脂肪酸转运体的底物。
- 只需一步操作，方法简单，适合于高通量筛选。
- 采用专利的淬灭技术，能够在活细胞上实时监测脂肪酸摄取动力学过程。
- 可替代耗时费力的放射学检测方法，降低成本，无放射性 。
- 不含任何放射性化合物大大降低了实验处理成本，并避免了与放射性测定相关的安全风险。
QBT 脂肪酸摄取检测试剂盒的数据
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纤维原细胞与脂肪细胞
将 3T3L1 脂肪细胞以 50,000 细胞/孔接种在 96 孔板中的 100µl DMEM/FBS 中，并在 37℃ 下培养 5 小时。然后用脂肪酸摄取溶液代替生长培养基。立即用 Molecular Devices FlexStation®3微孔板读板机进行动力学读数。A：脂肪细胞；B：成纤维细胞；C：无细胞（仅摄取试剂）。
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成纤维细胞与脂肪细胞；胰岛素剂量反应
将 3T3L1 脂肪细胞以 50,000 细胞/孔接种在 96 孔板中的 100µl DMEM/FBS 中，并在 37℃ 条件下培养 5 小时，然后剥夺血清（持续 1 小时）。将不同浓度的胰岛素加入孔中并于 37°C 下在 5% CO2 培养箱中孵育 30 分钟。在孵育时间结束时，将 100µl 脂肪酸混合物加入到孔中，并使用 FlexStation® 3 读板机立即开始动力学读数。痕量 A 至 F 分别对应于具有 160、16、8、1.6、0.16 和 0 nM 胰岛素的脂肪细胞；痕量 G 和 H 分别对应于具有 0 和 160nM 胰岛素的成纤维细胞。
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瘦蛋白抑制效应
将 3T3L1 脂肪细胞以 50,000 细胞/孔接种在 96 孔板中的 100μl DMEM/FBS 中，持续 5 小时，然后在 1 小时内用或不用瘦蛋白 (100 nM) 剥夺血清。然后将 10 nM 的胰岛素加入孔中，并在 37℃ 条件下，在含有 5% CO2 的培养箱中再培养 30 分钟。在培养时间结束时，将 100µl 脂肪酸加入孔中，并使用 FlexStation® 3 酶标仪（读板机）立即开始动力学读数。数据由 Cambridge Biotechnology 提供。A：胰岛素，B：胰岛素和瘦蛋白，C：基础。
QBT 脂肪酸摄取检测试剂盒的技术
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检测原理
QBT 脂肪酸摄取分析试剂盒包括含有荧光脂肪酸类似物的上样缓冲液以及淬灭染料，可以大大降低细胞外空间中的荧光。当将上样缓冲液加入细胞中时，荧光脂肪类似物转运到细胞中可导致荧光信号的增加，并可使用底部读数荧光酶标仪（读板机）进行实时监测。若受试化合物抑制脂肪酸转运，导致荧光信号相对于对照物降低。
检测原理
QBT 脂肪酸摄取分析试剂盒包括含有荧光脂肪酸类似物的上样缓冲液以及淬灭染料，可以大大降低细胞外空间中的荧光。当将上样缓冲液加入细胞中时，荧光脂肪类似物转运到细胞中可导致荧光信号的增加，并可使用底部读数荧光酶标仪（读板机）进行实时监测。若受试化合物抑制脂肪酸转运，导致荧光信号相对于对照物降低。
QBT 脂肪酸摄取检测试剂盒的资源
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