FLIPR 膜电位检测试剂盒

FLIPR® 膜电位检测试剂盒可提供基于均相荧光的制剂，用于观察与离子通道活化和离子转运蛋白相关的实时膜电位变化。

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FLIPR 膜电位检测试剂盒概览

每个均相检测试剂盒采用专属的荧光指示剂染料和淬灭剂组合，大大提升细胞系/通道/化合物的适用性，同时消除数据差异性产生的潜在原因。这种独特的配方比传统染料响应快 10 倍，具有更高的温度稳定性，可提供与手动膜片钳测定显示出充分相关性的高质量数据结果。

由于离子通道活性具有高度敏感性，并且可能会受到微小化学变化的影响，因此可以使用两种 FLIPR® 膜电位检测试剂盒（红色和蓝色）来为您的精细离子通道靶标选择最佳的条件。两种制剂都使用 Molecular Devices 专有的淬灭技术来增强信号窗口并产生可接受的 Z 因子值以筛选多种标靶，包括 TRP、配体、环核苷酸和电压门控通道。

与传统染料（如 DiBAC）不同， FLIPR 膜电位检测试剂盒可检测双向梯度变化，因此您可以在单个实验中同时监测变量和对照条件的效应。我们建议对两种检测试剂盒进行评估，以确定哪种剂型更适合您的靶标。

FLIPR 膜电位检测试剂盒的数据

比较膜片钳和 FLIPR 膜电位检测试剂盒的数据

手动膜片钳方法能够检测快速响应，允许检测膜电势中非常快速的变化。对比使用 FLIPR 膜电势检测试剂盒生成的数据与采用手动膜片钳方法获得的结果，显示出充分的相关性（图 1和 2）。可观察到离子通道的开放和关闭。这与 DiBAC 不同，DiBAC 只能显示膜电势的单向变化（图 3）。

在表达电压门控 K+ 通道的 CHO 细胞上，比较膜片钳 (mV) 和 FLIPR 膜电位（荧光）检测。数据由 Michael Xie，Millenium Pharmaceuticals 提供。

荧光与膜电位变化

膜电势变化与 FLIPR 仪器上荧光测定的相关性：转染 K+ 通道的 CHO 细胞与各种浓度的钾接触。数据由 Michael Xie，Millenium Pharmaceuticals 提供。

配体门控钙通道比较

在配体门控 Ca2+ 通道上，比较 FLIPR 膜电位检测试剂盒、DiBAC 和 Fluo-3 测定法。数据由 Michael Xie，Millenium Pharmaceuticals 提供。

两种膜电位试剂盒淬灭制剂选项

因为离子通道活性对干扰非常敏感，并且对特定离子通道的化学干扰具有高度不可预测性，所以 FLIPR 膜电势检测试剂盒具有两种剂型。这两种制剂结合了我们的专利膜电位指示染料和我们的专利淬灭技术的优点。一种剂型使用蓝色猝灭剂，另一种剂型使用红色猝灭剂。我们建议分别采用两个版本对每个单独的靶/细胞系进行评估，以确定哪种剂型可提供最佳性能。

通过河豚毒素调节 CHL-hH1 细胞中的 Nav1.5 通道。在该测定中，30mM 藜芦定被用于保持钠通道处于开放状态。随着河豚毒素浓度的增加，可进行调节。Na+ 快速流入细胞内，随后使膜去极化，从而导致荧光增加。在该测定中，膜电势红试剂盒可显示更大的信号窗口以及更大的 Z 因子。

FLIPR 膜电位检测试剂盒的技术

荧光强度可随着细胞膜电位的增加或减少而发生改变

FLIPR 膜电位检测试剂盒可通过增加或减少荧光信号以作为细胞膜电位的变化来检测离子通道调节。在膜去极化期间，染料可跟随细胞内带正电荷的离子而发生变换，使得荧光信号的强度增加。在膜超极化期间，当染料跟随带正电荷的离子离开细胞时，荧光信号强度将降低。该试剂盒特别适合与 FLIPR® Tetra 系统和 FlexStation® 3 微孔读板机的同步移液和读取功能搭配使用，以捕获与离子通道活化相关的快速动力学。

该试剂盒使用淬灭染料以减少背景荧光并提高信噪比。购买 FLIPR 检测试剂盒，即可获得 Molecular Devices 向药物发现和生命科学研究人员独家提供的专利淬灭技术（美国专利号 6,420,183，EPO 专利号 0 906 572）。