Transfluor 检测的概览

通过将荧光标记连接到 β-arrestin, 可以在受体激活期间监测受体-arrestin蛋白复合物的位置。由于脱敏仅发生在已激活的受体中,监测 β 抑制蛋白转位和随后的受体再循环可作为检测任何 GPCR 激活的一种方法。

研究这种机制使研究人员能够确定 GPCR 配体对行为、情绪、炎症、神经系统和嗅觉反应等各种生理过程的影响。此外,研究人员可以了解受体降解和特定靶点再循环的复杂性。

特点

  • 使用 100 种以上的 GPCR 进行验证,结果表明 Transfluor 检测可在所有 GPCR 种类(I、II、III 类)之间的工作中提供确信度,而无需考虑相互作用的 G 蛋白(Gs、Gi/o 和 Gq/11)。
  • 单次读取功能支持所有 GPCR 亚型,包括 Gi、Gs、Go、Gq,无需进行多重 GPCR 检测。
  • 无需对 GPCR 进行标记或标注,避免了自行改变分子结构可能会造成的靶点反应改变。
  • 形式通用,无需预先了解相互作用的 G 蛋白即可实现孤儿 GPCR 筛选。
  • 基于 GFP 的技术,无需加入额外的底物来监测 β-arrestin 转位。
  • MetaXpress® 应用模块可自动分析 β-arrestin 向细胞膜(小窝)和内吞囊泡的运动。
  • 不依赖配体的转位 (LITe™) 分析是一种不依赖激动剂的检测,可用于验证孤儿 GPCR 中的 β-arrestin-GFP 的转位。

Transfluor 检测的数据

  • transfluor ix

    Transfluor 检测的高内涵图像

    使用异丙肾上腺素刺激表达 ß2AR 的细胞。左侧:对照,中间:小窝,右侧:囊泡。顶部:使用 ImageXpress 进行成像的 Transfluor 检测。底部:使用 Discovery-1 进行成像的 Transfluor 检测。

  • 异丙肾上腺素的剂量效应

    采用 MetaXpress® 高内涵图像采集和分析软件的 GPCR 循环应用模块进行分割和分析。误差条显示标准误差。顶部:小窝,底部:囊泡。

    D1_图 5

  • 部分 GPCR 列表

    Transfluor 技术主要通过检测细胞中 β-arrestin-GFP 的活动来监测受体活性。已显示转位 β-arrestin-GFP 的 GPCR 部分列表如下所示。

    其他受体列表

    • 12果蝇 GPCR
    • Fz4 卷曲蛋白受体
    • TßRIII 转化生长因子-ß

Transfluor 检测的技术

  • 孤儿 GPCR 测定

    孤儿 GPCR 测定

    与目前筛选 GPCR 的方法相反,Transfluor 技术的创建基础是终止 GPCR 信号传导的机制,称为受体失敏。这种机制几乎是所有 GPCR 所共享的,且其通过配体结合而激活。Transfluor 技术不需要预先了解相互作用的 G 蛋白。Transfluor 技术的这一重要特性使其成为筛选孤儿 GPCR (oGPCR) 的理想选择。

    协助验证孤儿 GPCR 筛选的专有技术称为 LITe™(不依赖配体的转位),是一种不依赖激动剂的测定方法,可用于验证孤儿 GPCR 中 ß arrestin-GFP 的转位。

Transfluor 检测的资源

Transfluor 测定

产品名称 货号
Transfluor® 评估试剂盒(非商业用途) R8177
Transfluor® 评估试剂盒(商业用途) R8178
U2OS (G418) 大鼠 b-arrestin 2-RrGFP 亲本细胞系 TF-U2OS-rBA2GFP

Transfluor 评估试剂盒

Transfluor 评估试剂盒允许在有限的六个月评估期内一次性使用该技术。该试剂盒可为用户采用自己的仪器和 GPCR 评估技术提供所需的所有必要工具。这使得用户可以先对该技术进行熟悉了解,然后再考虑获取能满足其特定需求的分层许可选项。

 

Transfluor 评估试剂盒组件

  • U-2 OS β-arrestin 2-GFP 细胞(亲代细胞系, 以帮助检测 Transfluor 实验方法)
  • Transfluor 演示板(具有固定细胞的成像级板,以辅助仪器验证以及图像采集和分析)
  • 受限的标签许可证
  • Transfluor 评估试剂盒产品插页
  • U-2 OS β-arrestin 2-GFP 细胞产品插页
  • Transfluor 快速启动方案

 

Transfluor 用户指南(完整协议和故障排除指南)

有关此试剂盒的详细信息,请与当地销售代表联系。

分层许可选项

使用 Transfluor 技术需要购买 Molecular Devices 的 Transfluor 技术使用许可证,该许可证可以每年续订。可扩展的许可证结构(从研究至高通量筛选),包括以下示例:

  • Transfluor 测定研究定点许可证
  • Transfluor 测定研究全球许可证
  • Transfluor 筛选定点许可证
  • Transfluor 测定研究和筛选定点许可证

运行 Transfluor 测定还需要两个额外的第三方许可证:GFP 许可证(Molecular Devices 推荐 Prolume 海肾荧光素酶 (Rr) GFP 许可证)和 BioImage 的荧光再分发许可证。条款如下:

  • Prolume 许可证可以每年续订,仅象征性地收取少量费用。
  • BioImage 许可证是一次性收费。
  • Prolume 和 BioImage 许可证均可提供全球范围内的许可。

为简化您的流程,您可以直接从 Molecular Devices 公司获取这些许可证。或者,您也可以直接从 Prolume 和 BioImage 获取。

有关这些许可证的详细信息,请与当地销售代表联系。结合 Transfluor 许可证,Molecular Devices 还提供稳定转染的 GFP β-arrestin 启动子细胞系和相关质粒。

Transfluor 检测的兼容产品和服务

准备好了吗?

我们已准备好帮助您解决在研究中遇到的严峻挑战。我们具有遍布全球的经验丰富的专业技术团队,可帮助您实现下一个突破。

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