酶 - IMAP 检测的概览

基于磷酸基团与含三价金属阳离子的纳米微粒(微珠)之间的特异性、高亲和力相互作用,IMAP 是评估激酶、磷酸酶和磷酸二酯酶活性的常用平台,且无需抗体。使用荧光标记的底物进行酶活反应。加入 IMAP 结合系统可终止酶反应并引发微珠与磷酸化底物的结合。可以使用 FP 或 TR-FRET 进行读数来检测底物与微珠之间、与酶活性相关的结合情况。

IMAP 改进型结合系统

IMAP 底物

IMAP 测定法的数据

  • 样品 IMAP 数据:ROCKII 稀释曲线

    样品 IMAP FP 数据:ROCKII 稀释曲线

    使用改进型结合系统在 BSA 和 Tween IMAP 反应缓冲液中得到的 ROCKII 激酶稀释曲线。反应条件:ROCKII 激酶(上行:14-451)如图所示,100nM FAM-S6 衍生底物(5FAM-AKRRRLSSLRA-COOH,R7184),100µM ATP。IMAP 结合溶液条件:100% 结合缓冲液 A,改进型结合试剂 1:400。

  • FP 与 TR-FRET 检测

    使用十字孢碱对 Akt 进行抑制:IMAP TR-FRET(上图)和 IMAP FP(下图)检测的比较。反应条件:Akt 激酶(0.1u/ml, 上行:14-276), 300nM、1µM、3µM FAM-Crosstide(5FAM-GRPRTSSFAEG-COOH, R7110), 10µM ATP, 十字孢碱如图所示。IMAP 结合溶液:40% 结合缓冲液 A, 60% 结合缓冲液 B,改进型结合试剂 1:400。

    FP vs TR-FRET 检测

酶 - IMAP 检测的技术

  • IMAP FP 通用激酶和磷酸酶检测

    IMAP FP 激酶和磷酸酶检测

    使用 FP 方法进行 IMAP检测 原理:在激酶与荧光标记多肽反应后,加入结合溶液。小分子磷酸化荧光底物会结合到大分子 M (III) 纳米微粒上,由此可降低底物的旋转速度并因此增加其偏振性。

  • IMAP TR-FRET 通用激酶和磷酸酶检测

    IMAP TR-FRET激酶和磷酸酶检测

    使用TR-FRET方法进行IMAP检测 原理:在激酶与荧光标记多肽或蛋白质反应后, 加入结合溶液。在该系统中,纳米微粒结合有铽 (Tb) 供体分子。通过与 M(III)纳米微粒结合, 磷酸化的荧光底物与 Tb-供体紧密靠近,从而检测出 Tb-供体和磷酸化的荧光底物之间产生的 TR-FRET 效应。

  • IMAP FP 通用磷酸二酯酶检测

    IMAP FP 磷酸二酯酶检测

    使用 FP 方法进行 IMAP检测 原理:在磷酸二酯酶与荧光标记的底物反应后,加入结合溶液。小分子磷酸化荧光底物会结合到大分子 M (III) 纳米微粒上,由此可降低底物的旋转速度并因此增加其偏振性。

  • IMAP TR-FRET 通用磷酸二酯酶检测

    IMAP TR-FRET磷酸二酯酶检测

    使用TR-FRET方法进行IMAP检测 原理:在磷酸二酯酶与荧光标记的底物反应后,加入结合溶液。在该系统中,纳米微粒结合有铽 (Tb) 供体分子。通过与 M(III)纳米微粒结合, 磷酸化的荧光底物与 Tb-供体紧密靠近,从而检测出 Tb-供体和磷酸化的荧光底物之间产生的 TR-FRET 效应。

酶 - IMAP 检测的订购选项

IMAP 检测试剂盒

IMAP 评估试剂盒

IMAP 评估试剂盒
优化 800 数据点 IMAP 试剂盒, 包括校准物(磷酸化和非磷酸化肽), 可用于运行 FP 或 TR-FRET 检测的校准曲线

#R8166

$730.00 USD

1

IMAP TR-FRET 评估试剂盒(具有渐进式结合系统)

具有改进型结合系统的 IMAP TR-FRET 评估试剂盒
优化的 800 数据点模板使用改进型结合系统运行 IMAP;需要额外的激酶和底物

#R8161

$730.00 USD

1

IMAP FR PDE 评估试剂盒

IMAP FP PDE 评估试剂盒

#R8175

$1,338.00 USD

1

IMAP TR-FRET PDE 评估试剂盒(含 cAMP 和 cGMP 底物)

IMAP TR-FRET PDE 评估试剂盒
包括优化的方案,cAMP 和 cGMP 底物;客户自己提供 PDE 酶

#R8176

$1,338.00 USD

1

酶 - IMAP 检测的资源

酶 - IMAP 检测的兼容产品和服务

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