StemoniX 使用我们三种解决方案来验证他们的微脑 3D 试验板
公司/大学
StemoniX
使用的产品
FLIPR Penta 高通量实时荧光检测分析系统
SpectraMax i3x 多功能微孔板读板机
ImageXpress Micro Confocal 共聚焦高内涵成像分析系统
挑战
解决方案
StemoniX® 的科学家通过开发 microBrain® 3D 平台填补了这个缺口。他们使用 hiPSC 源性神经前体细胞,创造了更类似于人类皮质大脑的高同质性 3D 神经皮质细胞球。他们的平台包含成熟的神经元和星形胶质细胞,这些细胞与原代神经培养物类似,对神经调节物具有活性和反应。此外,他们将其平台设计为 96 孔和 384 孔样式,以便和高内涵筛选仪器结合使用,例如 FLIPR Tetra® 高通量细胞筛选系统和 ImageXpress® 显微共聚焦高内涵成像系统(均来自 Molecular Devices),从而对功能性人脑生理学进行体外同质评估。
使用的产品
FLIPR® Tetra® 高通量细胞筛选系统提供用于在药物发现过程中识别早期先导物以及用于评估药物疗效和毒性的自动化解决方案。由于移液加样和读取功能可同步运行,该系统支持快速动力学细胞检测。可根据化合物库大小、检测模式、筛选形式、实验及靶标类型等对其进行快速配置。作为一个全面集成的解决方案,它可实现从测定方法开发到先导物优化的无缝转换。
ImageXpress® Micro Confocal 转盘共聚焦高内涵成像分析系统通过速度、灵敏度和灵活性的理想组合来帮助您扩展研究范围。捕获整个生物有机体、厚组织、3D 细胞球分析以及细胞或细胞内事件的高质量图像。与 MetaXpress® 高内涵图像采集和分析软件结合时,ImageXpress Micro 共聚焦系统可提供完整的多维、高通量筛选解决方案,以帮助您发现下一个标志性科学突破。
SpectraMax i3x 多模式微孔读板机(酶标仪)可测定光吸收、荧光和化学发光,且具备模块化升级功能,可以实现免疫印迹检测、成像和注射器快速动力学检测。SpectraMax i3x 酶标仪(读板机)让您能够在一个系统中探索细胞通路以及蛋白质活化和表达,从而解开科学的奥秘。
结果
StemoniX microBrain 3D 平台是一个 96 孔和 384 孔样式的同质 3D 神经细胞球系统。使用 ImageXpress Micro 共聚焦系统进行明场捕获和自动化尺寸测量,观察到单个板中具有小于 4% 的典型变异系数的高同质性大小分布。使用 ImageXpress 显微镜进行免疫荧光分析发现,这些 3D 细胞球包含皮质神经元和星形胶质细胞,它们可显示细胞成熟度的关键标记物,如突触蛋白。此外,这些细胞球呈现出自发性同步钙振荡,这种振荡在 FLIPR 和 ImageXpress 系统中均可轻易检测到。通过使用已知作用机制检查一组神经调节物来证实 microBrain 3D 平台的功能成熟度。使用 FLIPR 系统可检测到神经活动的调节与这些化合物的预计活性相关,并可证实细胞球具有功能性谷氨酸能和 γ - 氨基丁酸回路。
最后,在毒理学案例研究中测试了对寨卡病毒感染具有不同效力的目标化合物库。首先,使用 SpectraMax® i3x 多模式微孔读板机(酶标仪) (Molecular Devices) 在 microBrain 3D 平台上研究此化合物库的细胞毒性。随后通过 FLIPR 系统以高通量方式研究功能毒性,以补充细胞毒性分析。最后,使用 ImageXpress 共聚焦显微镜生成了每次治疗后钙振荡的高分辨率视频。总而言之,将 microBrain 3D 集成至多个平台中,产生了对目标库毒理学特征的大量描述,并展现了集成该平台在复杂神经表型的体外研究、毒理学特征和药物筛选方面的可行性。