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约克大学使用 Axon 膜片钳仪器来研究泛连接蛋白通道在癫痫中的作用

约克大学

Georg Zoidl

Paige Whyte-Fagundes

MultiClamp 700B 微电极放大器

Axon Digidata 1550B 加 HumSilencer 低噪音数据采集系统

pCLAMP 11 软件套装

挑战

加拿大约克大学的 Zoidl 实验室主要通过将斑马鱼幼鱼用作其研究中的模式生物来研究生理学和病理学环境下泛连接蛋白通道在神经系统中的作用。

重点是解决文献中关于泛连接蛋白 1 (Panx1) 在癫痫(过去十年里一直存在)中的作用冲突观点。

Zoidl 实验室通过利用基因编辑 Panx1 基因创建功能失活突变,在斑马鱼中建立了一个癫痫模型,以解答有关 Panx1 通道在癫痫发作时是否发挥不同作用的问题。他们通过使用电生理学工具记录了 6-7 天大的斑马鱼幼鱼体内所选神经元网络癫痫发作活动的局部场电位。

该团队在记录期间保持神经元回路的完整性,并将电理学数据与行为表型实验结果配对,从而获得有关 Panx1 在癫痫中的作用新见解。与许多其他电生理学家一样,他们也需要处理其电生理学装置出现线频噪声干扰的难题。

Axon-2

解决方案

Axon Digidata 1550A/B HumSilencer 功能可让该团队消除 50/60 Hz 线频噪声,从而显示生物信号。这个内置可调 HumSilencer 功能可适应随时间不断变化的线频噪声。在特殊情况下可禁用自适应噪声学习,以便可在整个记录期间保存噪声模式。已保存的噪声模式可在每次新记录结束前后进行重置。

“我们的装置能够测定来自 6-7 天大的斑马鱼幼鱼体内的场记录内容。我们已在此操作方面获得了巨大的成功;毫无疑问,Axon 装置的灵敏度在让我们继续研究我们新型转基因斑马鱼系的回路方面起重要作用。”

结果

资深博士研究生 Paige Whyte-Fagundes 在设立电生理学装置来记录斑马鱼体内电生理学和引领研究癫痫中 Panx1 的项目方面不可或缺。

团队成员打算使用其现有的电生理学装置来研究各种转基因斑马鱼系间泛连接蛋白通道神经回路的生理学差异。迄今为止,他们已能够解决涉及到与 Panx1 基因敲除鱼中光刺激视觉处理有关的脑波律动的基本问题。他们还确定了 Panx1 在其癫痫模型中的神经保护特性,并发现了一种改变 FDA 批准药物原有用途来减少斑马鱼中癫痫活动的方式。

在最近的一篇论文中,他们在研究中就斑马鱼 Panx1a 基因敲除、视觉运动行为改变和多巴胺能信号转导之间的关系进行了报告,该研究结合了 RNA 测序分析、实时 PCR、视觉运动行为分析和体内电生理学。

Visuomotor deficiency in panx1a knockout zebrafish is linked to dopaminergic signaling

您可在其 ResearchGate 资料中了解更多有关 Georg Zoidl 实验室的信息