细胞计数仪
细胞计数仪：HepG2 细胞
HepG2 是一种源自肝细胞癌 (HCC) 患者肝组织的细胞系。它往往作为一种模型系统用于 HCC 以及药物代谢和毒性研究。培养物是贴壁型，呈现出上皮细胞形态，易于呈小规模成聚集，使得单个细胞计数变得困难。在合适的培养条件下，它们可能会形成适合进行肝病研究的独特顶面和基面。
图 1：使用 StainFree 测定覆盖区域百分比
HepG2 细胞使用 SpectraMax MiniMax 300 成像细胞计数器进行成像，细胞使用自定义、用户定义的分析设置检测。左图显示的是原始透射光图像，右图显示的是同一个图像，但有紫色掩膜，表明软件检测到的细胞。显示两种细胞密度进行比较。
图 2：对覆盖区域 (%) 进行的 StainFree 与荧光分析
按每孔 234 个至 30,000 个细胞接种的 HepG2 细胞的融合度用 StainFree 技术（蓝点）进行分析，或使用 EarlyTox™ 活细胞检测染料染色并分析荧光区域（绿点）。在整个细胞密度范围内，采用两种方法测定的图像目标区域的覆盖区域百分比基本吻合。
图 3：EarlyTox Caspase-3/7 NucView 488 检测
经培养基对照（左小图）或 200 µM capsaisin（右小图）处理的 HepG2 用 EarlyTox Caspase-3/7 NucView 488 检测试剂盒进行检测，并使用具备绿色荧光和透射光 (TL) 通道的 SpectraMax MiniMax 300 成像细胞计数器进行成像。顶排：显示绿色荧光标记的凋亡细胞的荧光图像。底排：显示对照细胞凋亡最少的对照细胞以及处理后的近 100% 细胞凋亡的细胞的TL 和荧光叠加图像。
图 4：EarlyTox Caspase-3/7 NucView 488检测（时程）
用 200 µM capsaisin（左栏）或培养基对照（右栏）处理 4.5 小时（红色栏）、6 小时（绿色栏）或 22 小时（蓝色栏）的 HepG2。用 EarlyTox Caspase-3/7 NucView 488 检测试剂盒评估凋亡情况。细胞用 5 µM NucView 488 底物孵育，并在指定时间点进行成像。
图 5：EarlyTox Caspase-3/7 R110 检测试剂盒和 EarlyTox 谷胱甘肽检测试剂盒
经 200 µM capsaisin（每对的左柱）或培养基对照（每对的右柱）处理的 HepG2 用可测定 caspase 活性的 EarlyTox Caspase-3/7 R110 检测试剂盒（红色和绿色柱）或可测定谷胱甘肽（一种早期指示）减少或凋亡的 EarlyTox 谷胱甘肽检测试剂盒（蓝色柱）进行检测。对于两种测定法，均使用 SoftMax Pro 软件中的预配置实验步骤在 SpectraMax i3x 多模式微孔板读板机上进行。
提示： HepG2 细胞以聚集或不规则细胞团形式生长，无法通过肉眼区分。一种定量 HepG2 细胞生长或融合度的有用方式是，使用 StainFree™ 技术测定细胞所覆盖的区域。在 TL 通道中采集到的图像可轻松通过场分析设置进行分析。可使用预定义“细胞”分析设置，或使用 SoftMax Pro 软件中的绘图工具设计一个自定义分析。
HepG2 细胞分析工具包
- SpectraMax® i3 多功能微孔板检测平台
- SpectraMax® MiniMax™ 300 成像细胞仪
- SoftMax® Pro 软件
仪器设置
分析类型：场分析
识别对象所需波长：TL
关于 StainFree 细胞检测技术
细胞成像检测通常需要借助于荧光染料对细胞标记，但会对活细胞产生毒性，或者仅可用于固定的细胞中使用。用于分析细胞计数和细胞融合度的无标记方法可让研究者定量监测细胞增殖和健康状况，无需进行那些可能会影响细胞活力且耗时的工作流程。
具备 MiniMax 300 成像细胞仪的 SpectraMax i3 多功能微孔板平台采用较独特且StainFree 细胞检测技术，让您能够进行细胞增殖、毒性和其他测定，无需使用可与 DNA 相结合的细胞核染色，如 DAPI，或从长远来看确实会对细胞产生毒性的活细胞染料。