检测、定量并分析蛋白
蛋白检测、定量和分析对研究各种生物学过程极为重要。从蛋白纯化和标记到电泳样品制备的各个过程,测定蛋白浓度是必不可少的。
蛋白定量是测定样品中总蛋白的浓度。蛋白可通过 280 nm 处的吸光度来直接定量,或使用灵敏度更高的比色法(BCA 法、Bradford 等)或荧光法间接定量。要检测和测定复杂样品(如血清或细胞裂解物)中的某种特定蛋白,可使用酶联免疫吸附测定法 (ELISA)。
细胞信号转导和其他生物学过程可使用荧光蛋白进行分析。例如,绿色荧光蛋白 (GFP) 可在活细胞中表达,并可在实验条件下用于观察定位和蛋白动力学。色氨酸是一种荧光发射特性会受其微环境影响的氨基酸,也一直用于获取有关蛋白质构象变化情况的信息。
蛋白定量和分析方法
带有吸光度、荧光和发光检测模式的微孔板读板机可以提供一个通用的蛋白定量和研究解决方案。我们的应用说明展示了如何使用这些仪器来获取和分析结果。
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荧光蛋白应用
真核细胞内的蛋白质处于一种动态平衡状态,在合成和降解之间存在高度调节的平衡。经过数十年的研究,人们已经充分了解蛋白合成,但仅在过去二十年,我们对蛋白降解的认识才取得了很大的进步。荧光蛋白可用作报告基因来研究蛋白质降解和相关细胞信号转导通路。
在我们的应用说明中了解有关如何使用荧光蛋白酶传感器的更多信息。
IgG 定量
在治疗性蛋白质工程和细胞系开发中,IgG 定量是测定免疫球蛋白 G (IgG) 含量的过程,其中 IgG 是基因修饰细胞系产生的一种常见治疗性蛋白质。这对于评估和监测细胞系的生产力以及选择最佳候选物用于进一步开发治疗性抗体而言非常重要。
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测定蛋白浓度(Bradford、BCA 等)
蛋白质浓度可通过紫外分光光度计中 280nm 处的吸光度来直接测定,或使用 BCA 或 Bradford 检测等比色法来间接测定。甚至还可以使用荧光法来定量蛋白质。
以下是您可能感兴趣的关于蛋白质定量的一些应用说明:
色氨酸检测
蛋白发出内源荧光是由于存在芳香族氨基酸色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸。色氨酸可控制蛋白的释放,对溶剂极性和局部环境最为敏感。分析色氨酸荧光的变化情况可得出蛋白质变性和构象方面的信息。
在这些应用说明中,我们展示了 SpectraMax® 多功能微孔板读板机用于测定各种固有色氨酸荧光检测时的性能。
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蛋白质印迹实验
蛋白质印迹是一种常用的蛋白检测和定量的技术。了解有关于检测蛋白质印迹膜上蛋白的各种技术的信息,包括比色法、荧光法和化学发光法。我们还将向您介绍多功能微孔板读板机上一种新型的蛋白印迹检测系统。
前沿资源
蛋白质定量和分析的资源
应用文章
To achieve over 5 fold of human IgG protein detection signal enhancement with 1 round of CloneDetect K8495 assay optimization
通过 1 轮 CloneDetect K8495 测定优化,可使人 IgG 蛋白检测信号增强 5 倍以上
蛋白 G (Pro G) 是一种较大的细胞表面结合蛋白,具有一个可与 IgG 的结晶片段 (FC) 区域高亲和力结合且含 55 个残基的重复结构域。连同蛋白 A (Pro A),……
宣传页
Quickly and easily quantify IgG with ValitaTiter
通过 ValitaTiter 快速、轻松定量免疫球蛋白 G (IgG)
集成 ValitaTiter 和 Molecular Devices 荧光极化 (FP) 读板机可进行无缝 IgG 滴度测定设置和优化。细胞系开发团队将实现……
应用文章
Spectral Fusion™ Illumination technology for an extended dynamic range on the SpectraMax i3x Multi-Mode Microplate Reader
在 SpectraMax i3x 多功能微孔板读板机上使用 Spectral Fusion™ 照明技术可扩展动态范围
许多微孔板读板机和分光光度计均使用光电倍增管 (PMT) 来检测荧光和发光信号。PMT 的工作原理是首先检测来自样品的光子……
电子书
Virology and Vaccine Research Microplate Reader Solutions
病毒学和疫苗研究微孔板读板机解决方案
我们明白,对于正在努力加速进行检测、使药物尽快推向市场以及致力于支持科学家……的人来说,这是一个多么具有挑战性的时刻
博客
COVID-19 Timeline: Diagnostics, Vaccines, and Therapeutic Antibody Development
COVID-19 时间线:诊断、疫苗和治疗性抗体开发
全球研究工作都致力于了解严重急性呼吸综合征冠状病毒 2 型(SARS-CoV-2),从而开发出 COVID-19 的潜在治疗方法。加入我们,探索科学时间线......
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The Ultimate Guide to Microplate Reader Solutions
微孔板读板机解决方案的最终指南
评价微孔板读板机的优劣并不复杂,首先,请考虑您的应用需求。如果预算有限,符合您目前主要应用的单模式读板机可能......
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Streamline absorbance assays for nucleic acid & protein quantitation
简化核酸和蛋白定量的吸光度检测
吸光度微孔板读板机广泛用于基础研究、药物发现、生物测定验证、质控以及制药、生物科技、食品和饮料的生产过程……
应用文章
Measure total protein in cell lysates with SpectraMax ABS Plus Microplate Reader
使用 SpectraMax ABS Plus 微孔板读板机测量细胞裂解物中的总蛋白
对细胞裂解物中的蛋白浓度进行定量是蛋白印迹法和酶联免疫吸附实验 (ELISA) 等许多下游应用的一个关键步骤。
应用文章
Streamline BCA-based protein quantitation on the SpectraMax iD5 reader
在 SpectraMax iD5 微孔板读板机上进行基于 BCA 方法的蛋白定量
了解如何在 SpectraMax® iD5 多功能微孔板读板机上使用 BCA 蛋白检测试剂盒来定量细胞蛋白样本。
应用文章
Measure intrinsic tryptophan fluorescence on the SpectraMax iD3 microplate reader
在 SpectraMax iD3 微孔板读板机上检测色氨酸的内源性荧光
蛋白发出内源荧光是由于存在芳香族氨基酸色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸。色氨酸的激发波长最长约为 270-280 nm 且其发射......
应用文章
Intrinsic tryptophan detection with the SpectraMax i3 Multi-Mode Microplate Platform
使用 SpectraMax i3 多功能微孔板读板机进行色氨酸测定
蛋白发出内源荧光是由于存在芳香族氨基酸色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸。色氨酸的激发波长最长约为 270-280 nm 且其发射......
应用文章
Using the NanoOrange Protein Kit with SpectraMax Microplate Readers
将 NanoOrange 蛋白试剂盒与 SpectraMax 微孔板读板机(酶标仪)配套使用
本应用说明介绍了如何在带有荧光检测模式的 SpectraMax® 微孔板读板机(酶标仪)中使用 Life Technologies 的 NanoOrange® 蛋白定量试剂盒……
应用文章
Protein quantitation with the EMax Plus Microplate Reader
使用 EMax Plus 微孔板读板机(酶标仪)进行蛋白定量
利用微孔板读板机(酶标仪)进行终点法检测在实验室中用途广泛,因为吸光度已经成为许多应用的优选检测方法。示例包括用于定量细胞因子和蛋白的 ELISA…
应用文章
Multiplexing Fluorescent and Chemiluminescent Live Cell Reporters to Dissect NFkB Signal Transduction Requirements
利用多重荧光和化学发光活细胞报告基因来详细分析核因子 κB (NFkB) 信号转导要求
采用 Clontech Laboratories 的化学发光 Ready-To-Glow Secreted Metridia Luciferase 报告基因系统来监测肿瘤坏死因子-α (TNF-α) 诱导的 NFκB 反应元件活化,以及......
应用文章
Direct protein quantitation using the SpectraDrop Micro-Volume Microplate
使用 SpectraDrop 超微量检测板可直接进行蛋白定量
使用紫外光吸光度进行蛋白定量是一种快速、无损的方法,它取决于色氨酸和酪氨酸残基的近紫外光波长吸光度…...
科学海报
Measurement of Proteosome Inhibition in Live Cells on the Analyst® GT, FLEXstation® and Gemini EM Microplate Readers Using the BD Biosciences Proteasome Sensor
使用 BD 生物科学蛋白酶体传感器在 Analyst® GT、FLEXstation® 和 Gemini EM 微孔板读板机(酶标仪)上测定活细胞中的蛋白酶抑制情况
蛋白酶体是一种存在于所有真核细胞(以及某些细菌)内的巨型蛋白复合体,可通过将无用蛋白分解成短肽来将其消除。它包含一个……