什么是核酸?
核酸是存在于细胞中的大型复杂生物分子。它们是活性生物的遗传物质,并且包含所有活性生物的形成和功能指令。通常,有两种天然形成的核酸:脱氧核糖核酸 (DNA) 和核糖核酸 (RNA)。
DNA 和 RNA
DNA 和 RNA 包含核苷酸,各自都由一个 5-碳糖、一个含氮碱基和一个磷酸基构成。DNA 由一条包含成对核苷酸的双链组成,而核糖核酸 (RNA) 通常为一条单链。DNA 中的核苷酸包括腺嘌呤、胞嘧啶、鸟嘌呤和胸腺嘧啶,而 RNA 中含有尿嘧啶而不含胸腺嘧啶。DNA 核苷酸的序列组成被称为基因的单位,其中含有编码个体蛋白的信息。基因的 DNA 会被转录成基因的 RNA 拷贝,随后作为蛋白合成的模板。
DNA 损伤和突变会改变基因序列,从而导致蛋白功能失调,扰乱正常细胞的功能。癌症就是遗传突变扰乱细胞行为的正常调控后导致细胞生长失控的最佳示例。通过研究基因功能和诱发疾病的遗传改变,可以不断发现新的治疗方法。
核酸检测和定量方法
核酸通常从细胞中纯化而来,可作为测序和基因编辑等不断发展的分子生物学检测方法系列的一部分。在用于下游应用之前,核酸使用紫外光 (UV) 或荧光分光光度法进行检测和定量。传统的样品定量分析是采用比色皿进行低通量单次测定,现在通常采用高通量的微孔板进行检测。
Molecular Devices 提供一套检测、定量和分析核酸的完整工作流程解决方案。我们的应用说明显示,与其他方法相比,以微孔板形式来定量和分析核酸可提供更高的通量并能自动计算结果。
-
DNA/RNA 吸光度测量
在分光光度计或微孔板读板机上测得的 DNA 样品在 260 nm 处的吸光度可用于计算其浓度。DNA 吸光度定量适用于范围介于大约 0.25 ug/mL 至大约 125 ug/mL 的微孔板样品。
通过我们的特色应用说明,了解如何使用光吸收型微孔板读板机测量吸光度值:
-
荧光定量核酸
DNA 定量是分子生物学研究领域中的重要步骤,需要更高的准确性、可靠性并减少样品使用量(如高通量测序)。相比分光光度法 DNA 定量,荧光法具有多种关键优势,如显著提高灵敏度、对双链 DNA (dsDNA) 的选择性高于单链 DNA (ssDNA) 或 RNA,以及可提高污染物耐受性(蛋白质和碳水化合物分子)。
以下是您可能感兴趣的关于核酸荧光定量的一些应用说明:
SNP 基因表型
基因分型是一种通过检测个体的 DNA 序列来分析个体间基因差异的过程。单核苷酸多态性 (SNP) 是最常见的遗传变异类型之一,包含单个核苷酸在特定位点的突变。经证明 SNP 基因分型在检测不同物种的疾病相关突变方面非常有用,因此,已开发了许多 SNP 检测技术。
前沿资源
核酸 (DNA/RNA) 定量和分析的资源
应用文章
Sensitive RNA fluorescent quantitation with the Quant-iT RiboGreen RNA assay kit
使用 Quant-iT RiboGreen RNA 检测试剂盒进行灵敏的核糖核酸 (RNA) 荧光定量
核酸浓度的准确定量对于转染、克隆、PCR 和下一代测序 (NGS) 等下游应用而言至关重要。通常,这些……
应用文章
Spectral Fusion™ Illumination technology for an extended dynamic range on the SpectraMax i3x Multi-Mode Microplate Reader
在 SpectraMax i3x 多功能微孔板读板机上使用 Spectral Fusion™ 照明技术可扩展动态范围
许多微孔板读板机和分光光度计均使用光电倍增管 (PMT) 来检测荧光和发光信号。PMT 的工作原理是首先检测来自样品的光子……
电子书
Virology and Vaccine Research Microplate Reader Solutions
病毒学和疫苗研究微孔板读板机解决方案
我们明白,对于正在努力加速进行检测、使药物尽快推向市场以及致力于支持科学家……的人来说,这是一个多么具有挑战性的时刻
电子书
The Ultimate Guide to Microplate Reader Solutions
微孔板读板机解决方案的最终指南
评价微孔板读板机的优劣并不复杂,首先,请考虑您的应用需求。如果预算有限,符合您目前主要应用的单模式读板机可能......
应用文章
Sensitive fluorescent quantitation of DNA with the Quant-iT PicoGreen dsDNA Assay Kit
使用 Quant-iT PicoGreen dsDNA 检测试剂盒对 DNA 进行灵敏的荧光定量
通常,可使用微孔板读板机(酶标仪)通过测定 DNA 溶液在 260 nm 处的吸光度定量双链 DNA。然而,该方法仅能够测定低至大约250......
文献
Multiple Steps from Microplate-Reader Workstations
微孔板读板机工作站的多个步骤
科学家可采用多种方法来克服工作流程中的瓶颈。例如,一个包含微孔板读板机的工作站可处理多个步骤,以此提有效率并增加……
电子书
Streamline absorbance assays for nucleic acid & protein quantitation
简化核酸和蛋白定量的吸光度检测
吸光度微孔板读板机广泛用于基础研究、药物发现、生物测定验证、质控以及制药、生物科技、食品和饮料的生产过程……
应用文章
Low-volume, high-throughput DNA and protein detection on the SpectraMax ABS Plus Microplate Reader
在 SpectraMax ABS Plus 微孔板读板机(酶标仪)上进行 DNA 和蛋白质微量样品的高通量检测
在遗传学和分子生物学的许多复杂的上游检测,核酸和蛋白定量是必不可少的步骤。已开发了各种方法来定量…
应用文章
DNA and RNA absorbance measurements using SpectraMax Microplate Readers
使用 SpectraMax 微孔板读板机(酶标仪)进行 DNA 和 RNA 光吸收检测
当 Molecular Devices 推出紫外微孔板读板机(酶标仪)时,就实现了检测微孔板中样品紫外光 (UV) 区段光吸收值的测定。从此之后,DNA、RNA 的微孔板测定,以及…
应用文章
Quantitation of dsDNA samples using the SpectraMax Quant dsDNA Assay Kits
使用 SpectraMax Quant dsDNA 检测试剂盒进行微量 dsDNA 定量分析
由于不同类型的测试样品可能含有不同浓度的 DNA,因此选择具备所需灵敏度和检测范围的合适荧光试剂是…...
应用文章
Detect SNPs with KASP genotyping technology on SpectraMax microplate readers
使用 KASP 基因分型技术在 SpectraMax 微孔板读板机(酶标仪)上检测 SNP
基因分型是一种通过检测个体的 DNA 序列来分析个体间基因差异的过程。许多可用于基因分型的方法让研究人员能够研究......