单克隆抗体生产

传统的单克隆抗体 (mAb) 生产过程通常始于将骨髓瘤细胞与产生所需抗体的脾细胞（如 B 细胞）融合，从而生成产 mAb 的细胞（即杂交瘤细胞）。这些 B 细胞通常来自于动物，常为小鼠。细胞融合之后，根据抗原特异性和免疫球蛋白类别对大量克隆进行筛选和选择。一旦确定候选杂交瘤细胞株，就可通过各种下游功能检测来确认、验证和表征每个“命中”的候选细胞株。完成后，通过后续工艺放大培养规模。

典型的单克隆抗体生产过程。

典型的单克隆抗体生产过程

  1. 小鼠免疫接种和脾细胞分离 - 给小鼠免疫接种抗原，随后筛查其血液中是否有抗体产生。之后，分离出产抗体的脾细胞以进行体外杂交瘤细胞生产。
  2. 骨髓瘤细胞的制备 - 骨髓瘤细胞属于永生细胞，一旦与脾细胞融合，就能致使杂交瘤细胞无限增殖。制备骨髓瘤细胞用于融合。
  3. 融合 - 在添加会使细胞膜融合的聚乙二醇 (PEG) 的情况下，骨髓瘤细胞和分离的脾细胞会融合在一起形成杂交瘤细胞。
  4. 克隆筛选和挑选 - 根据抗原特异性和免疫球蛋白类别对克隆进行筛选和选择。
  5. 功能性表征 - 确认、验证和表征（例如 ELISA）每个可能高产的克隆。
  6. 扩大规模和戒断 - 扩大生成所需抗体的克隆规模并戒断筛选剂。
  7. 扩增 - 扩增生成所需抗体的克隆（如生物反应器或大摇瓶）。

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