采用噬菌体展示技术用于抗体发现

噬菌体展示

噬菌体展示是一种用来研究噬菌体表面展示的蛋白与其他分子(如肽、DNA 和其他蛋白)间的相互作用的技术。噬菌体展示技术通常用于发现抗体与抗原间的高亲和相互作用,这些相互作用在病毒致病机制、疫苗和其他治疗方面发挥关键作用。

与现场应用科学家 Rebecca Kreipke 一起观看视频,她将带您逐步了解我们的解决方案,以加速您的噬菌体展示工作流程。

https://share.vidyard.com/watch/Q17RnfyoKg9b2ZbWmstzRh

噬菌体展示工作流程

自动解决方案可提高您的噬菌体展示的工作流程效率

噬菌体展示技术工作流程是一种可靠、易于执行且成本低廉的方法,通过该方法可从包含多达数十亿潜在临床相关抗体的大型组合库中确定特异性高亲和力抗原结合物。这使其特别适用于从自动解决方案中受益,让您能够减少确定有希望的抗体靶标和进行快速追踪发现所需的手动工作。

采用噬菌体展示技术的抗体发现工作流程

噬菌体展示步骤

第 1 步:筛选

筛选是一个迭代过程,用于富集群体内相较于其他噬菌体可高亲和力地结合感兴趣靶标的噬菌体。首先将文库暴露于您所选择的抗原,以通过高亲和力结合富集您的噬菌体群,然后仅洗脱和扩增具有较高结合亲和力的噬菌体。

第 2 步:克隆挑取

从上一步中选出的噬菌体随后会经过克隆和挑选,以分离出各种独特的结合蛋白。

第 3 步:抗原与抗体间的相互作用

在筛选期间,排除展示较低亲和力蛋白的噬菌体,筛选出展示较高亲和力蛋白的噬菌体。这一定性选择过程需要使用更多的定量免疫测定法(如 ELISA、免疫荧光法、HTRF、补体固定法、凝集法和/或沉淀法)来进行验证,从而评估抗体与抗原间的相互作用。

第 4 步:功能筛选

在描述抗体与抗原间的相互作用后,通常就会通过细胞实验筛选候选分子的功能活性(如病毒中和或疫苗效力)。

用于产生抗体的噬菌体展示技术

QPix™ 系统加速了筛选噬菌体展示抗体的工作流程

从生物技术到合成生物学的工业应用都使用噬菌体展示,因为它具有高通量的蛋白相互作用测定和蛋白质工程的能力。但是,为了选择从噬菌体库(约 107-1012)中检测初始靶标的高亲和性结合物或配体,需要洗去非结合型噬菌体,并且与靶分子特异性结合的噬菌体通过 3-5 轮淘选进行洗脱和收获。使用常规方法同时筛选具有不同抗原的多重选择时,可能会很费力。为了加速筛选,科学家将 QPix™ 系统等新技术合并至其工作流程,以加速其噬菌体展示抗体筛选。

噬菌体展示技术

QPix 系统非常适合于对克隆的接种和挑选进行自动化,且非常适合于完整的噬菌体库管理系统。

  • 以每小时 3000 个克隆的速度进行挑选,效率超过 98%。
  • 每天 8 小时的无人值守运行时间
  • 一天筛选并挑取 30,000 个克隆

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