单克隆抗体 (mAb)

单克隆抗体 (mAb) 发现

单克隆抗体 (mAb) 源于一个独特的亲本细胞,因此仅可结合单个表位。单克隆抗体发现通常指筛选和识别可靶向用于疾病诊治的特异性表位的特异性抗体,如 COVID-19 的冠状病毒

有多种方法可产生治疗性单克隆抗体。其中两种最常见的生产方法为杂交瘤细胞和噬菌体展示技术。

通过杂交瘤细胞生产单克隆抗体

通过杂交瘤细胞生产单克隆抗体

在这种方法中,科学家将永生化骨髓瘤细胞与从之前暴露于目标抗原的动物中所获得的脾细胞相融合。所产生的融合细胞称为杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的优势在于其既能产生单克隆抗体同时又能无限增殖,而脾细胞的寿命则是有限的。研究人员随后可根据抗原特异性和免疫球蛋白类别筛选数千种杂交瘤细胞,从而识别出理想的杂交瘤细胞。这些候选细胞随后被分析、特性检测并按比例扩大,以进行下游的流程。

查看杂交瘤细胞工作流程

通过噬菌体展示技术生产单克隆抗体

通过噬菌体展示技术生产单克隆抗体

在这种方法中,某个抗体的可变轻重链基因可被引入噬菌体外壳蛋白基因,导致产生在其表面展示抗体的噬菌体。通过使用这种策略,科学家可生成一个含数百万种不同抗体的抗体库。随后根据目标抗原对这些展示噬菌体进行筛选,并识别、分离和进一步表征具有高度特异性的噬菌体以进行下游工作。

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如何生产单克隆抗体?

单克隆抗体 (mAb) 传统生产过程通常始于将骨髓瘤细胞与产生抗体的所需脾细胞融合(如 B 细胞),从而生成产生 mAb 的细胞(即杂交瘤)。这些 B 细胞通常来自于动物,常为小鼠。细胞融合之后,根据抗原特异性和免疫球蛋白类别对大量克隆进行筛选和选择。一旦确定候选杂交瘤细胞株,则通过各种下游功能检测确认、验证和表征每个候选细胞株。完成后,扩大其他下游生物过程中的克隆规模。

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单克隆抗体

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