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细胞株开发工作流程

利用 CHO、杂交瘤或 HEK 293 等细胞系生成重组蛋白的工作流程。

针对重组蛋白的细胞系开发

为了生成高产量的重组蛋白产品,CHO、杂交瘤或 HEK 293 等细胞系成为典型的首选平台。开发稳定细胞系的过程始于用重组质粒转染宿主细胞(CHO 或 HEK 293),或通过细胞融合获得杂交瘤。转染或细胞融合后,根据目标蛋白(治疗性生物制剂)的表达情况对大量克隆进行筛选和选择。确定候选克隆后,通过 DNA 测序和各种下游分析测定,对每个“候选物”进行确认、验证和表征。完成后,在进行生物工艺的位置扩大和扩展先导克隆。

典型细胞系开发过程的步骤

典型细胞株开发流程

生成重组蛋白的工作流程

  1. 转染 - 用编码目标蛋白的重组质粒转染宿主细胞。
  2. 转染细胞池的选择 - 选择稳定且能产生目标蛋白的细胞。
  3. 克隆筛选和选择 - 筛选和选择可高表达目标蛋白的克隆。
  4. 细胞株表征 - 验证和表征每个克隆的稳定性和生产力。
  5. 扩增和下游评估 - 扩增克隆并进行下游生物工艺评估,建立细胞库。

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