COVID-19 响应——我们致力于在这场大流行病期间为科学界提供支持。了解更多

细胞株开发

细胞株开发

稳定细胞株广泛用于许多重要的应用,包括生物制品(如重组蛋白和单克隆抗体)生产、药物筛选和基因功能研究。开发稳定细胞株的过程通常始于将所需的质粒转染至选定的宿主细胞,一般是 CHO 或 HEK 293 细胞。转染后,研究人员筛选和定量分析高表达的细胞克隆。一旦检测到这些高产细胞株,便进一步对这些细胞和其产生的蛋白质进行验证。

传统上用于细胞株开发的人工筛选方法既费时又费力,因此对高通量自动化解决方案提出了巨大的需求。下面常规的工作流程有助于确定可以帮助您进行研究的系统。

 

 

细胞系工作流程

 

细胞株开发流程:

  1. 转染 - 将外源 DNA(编码目标重组蛋白)导入宿主细胞的过程。携带插入其基因组的外源 DNA 且可长时间保持其表达重组蛋白能力的一小群细胞被称为稳转细胞。

  2. 抗体筛选/滴度测定 - 从转染后的细胞池中发现和挑选优质克隆。通过定量测定细胞表面目标蛋白或分泌抗体(滴度测定)的表达情况来筛选大的细胞群,将增加发现高亲和力产物或高产细胞株的概率。

  3. 单细胞分离和细胞活性 - 必须分离并克隆单个活细胞以确保细胞群的基因相同,从而显著降低表达的异质性。

  4. 单克隆性保证 - 当开发用于生物治疗药物的细胞株时,从质量和监管角度来看,确保该细胞株是源于单个祖细胞的单克隆细胞至关重要。单克隆性的记录(治疗细胞株的一个监管指标)通常都是图像形式的,据此可记录单细胞的图像并将其纳入监管文件中。

  5. 克隆产量筛选和滴度 - 这是一项测定克隆源性细胞株所产生的重组蛋白或抗体产量的检测。

 

 

开发细胞株的应用和方法

细胞株开发的资源

视频和网络研讨会

分泌非单克隆抗体蛋白的哺乳动物细胞工作流程

选择高产分泌非单克隆抗体蛋白的哺乳动物细胞工作流程 - SynBioBeta 闪电演讲

细胞系开发工作流程

细胞株开发的多种不同工作流程

细胞株开发的相关产品和服务