细胞计数仪
细胞计数仪：MCF-7 细胞
十月是乳腺癌宣传月，因此我们决定重点关注 MCF-7 乳腺癌细胞系。这个细胞系于1970年来源于一位名为 Sister Catherine Frances (Helen Marion) Mallon 的修女，并以发现它的密歇根癌症基金会命名。MCF-7 是少数表达较高水平的雌激素受体 (ER) α 的乳腺癌细胞系之一，因此为研究人员研究 ER 阳性乳腺癌提供了一个有价值的模型系统。将“MCF-7 细胞”输入 PubMed，你会查找到超过 20,000 篇关于这个有名细胞系的参考文献。
图 1：使用 SpectraMax MiniMax 细胞计数仪获得的图像
MCF-7 细胞用 EarlyTox™ 活细胞红色染料染色，然后使用 SpectraMax MiniMax 细胞计数仪进行成像。使用用户定义自定义设置来检测细胞。A：透射光图像；B：用 EarlyTox 活细胞红色染料染色的胞核；C：使用 StainFree 分析识别出的细胞（紫色图层为软件识别出的细胞）。
图 2：StainFree 细胞计数 vs 荧光细胞计数
MCF-7 细胞按每孔 156 至 20,000 个细胞的密度进行接种，细胞核用 EarlyTox 活细胞红色染料染色。每孔获得 4 个位置的图像，并选择孔中间的目标区域进行分析。随后使用 StainFree 方法（蓝色圆圈）或对红色荧光细胞核计数（红色圆圈）来进行细胞计数。
图 3：EarlyTox 活细胞/死细胞检测
MCF-7 细胞用梯度稀释的 staurosporine 处理 24 小时，然后用 Molecular Devices 的 Early Tox 活细胞/死细胞检测试剂盒进行检测。活细胞用 Calcein AM（绿色染料）染色，死细胞用双嵌入剂乙锭均二聚物（红色染料）染色。在 SpectraMax i3x 多功能微孔板读板机上对该孔板进行读数。结果绘制为绿色/红色比例与化合物浓度的关系图，并使用 SoftMax Pro 软件计算IC50 值为21.2nM。
提示：
MCF-7 细胞具有不规则大小的多边形形态，并且有凝结成大聚合物的习惯。对于 StainFree 细胞计数，使用 “创建新设置” 并使用黄色绘制工具在细胞边界内轻轻绘制。使用蓝色绘制工具来标记细胞边界外的区域。或者，你可以使用 “CellsC” 预定义设置，但可能并不是十分准确。
MCF-7 细胞分析工具包
- SpectraMax® i3x 多模式微孔板检测平台
- SpectraMax® MiniMax™ 300 成像细胞仪
- SoftMax® Pro 软件
透射光 (TL)
713 nm（红色荧光）
TL 曝光：7 ms
TL 对焦调节：-10 µm
713 曝光：6 ms
713对焦调节：0µm
分析类型：离散对象分析
识别对象所需波长：TL (StainFree) 或 713（红色细胞核）
关于 StainFree 细胞检测技术
细胞成像检测通常需要借助于荧光染料对细胞标记，但会对活细胞产生毒性，或者仅可用于固定的细胞中使用。用于分析细胞计数和细胞融合度的无标记方法可让研究者定量监测细胞增殖和健康状况，无需进行那些可能会影响细胞活力且耗时的工作流程。
具备 MiniMax 300 成像细胞仪的 SpectraMax i3 多功能微孔板平台采用较独特且StainFree 细胞检测技术，让您能够进行细胞增殖、毒性和其他测定，无需使用可与 DNA 相结合的细胞核染色，如 DAPI，或从长远来看确实会对细胞产生毒性的活细胞染料。