细胞计数仪
细胞计数仪：Jurkat 细胞
Jurkat 细胞是二十世纪七十年代末从一个患有 T 细胞白血病的小男孩的外周血中发现的，它是一种永生的 T 淋巴细胞系。它们一直被用于研究 T 细胞白血病、T 细胞信号转导以及癌细胞对药物治疗的敏感性。这些小的圆的细胞在悬浮液中很容易生长，而且还被用作这里展示的各种细胞活性和凋亡检测的模型系统。
图 1：StainFree 细胞计数
Jurkat 细胞使用 SpectraMax MiniMax 300 成像细胞计数仪进行成像，并使用预定义的 “CellsC” 设置进行检测。左图显示的是原始透射光图像，右图显示的是同一个图像，但有紫色图层，代表软件检测到的细胞。显示的两种细胞密度：96 孔板每孔接种 50,000 - 1562 个细胞。
图 2：StainFree 细胞计数 vs 荧光细胞计数
按密度范围从每孔 390 至 50,000 个细胞接种的 Jurkat 细胞使用 StainFree 技术进行计数（蓝色圆圈），或用 EarlyTox™ 活细胞检测染料进行染色，并对绿色荧光细胞进行计数（绿色圆圈）。在整个细胞密度范围内，使用两种方法获得的细胞计数结果基本吻合。每孔四个位点进行细胞计数。
图 3：EarlyTox™ 活细胞/死细胞检测
Jurkat 细胞用梯度稀释的 staurosporine（红色圆圈）、camptothecin（绿色圆圈）和 etoposide（蓝色圆圈）处理 24 小时，然后用 Molecular Devices 的 Early Tox 活细胞/死细胞检测试剂盒进行检测。活细胞用 calcein AM（绿色染料）染色，死细胞用双嵌入剂乙锭均二聚物（红色染料）染色，并使用 WellScan 功能在 SpectraMax i3x 多功能微孔板读板机上读取，该功能可在整孔中以规律的间隔读取多次。将结果绘制为绿色/红色的比例与化合物浓度的关系图。本实验中使用的所有化合物均在 24 小时内引起细胞活性急剧下降。
图 4：EarlyTox Caspase-3/7 NucView™ 488 检测
Jurkat 细胞用 staurosporine（红色圆圈）、camptothecin（绿色圆圈）或 etoposide（蓝色圆圈）处理 28 小时，然后用 EarlyTox Caspase-3/7 NucView 488检测试剂盒检测凋亡。表达 caspase-3/7 的细胞用绿色荧光染色，并使用 SpectraMax MiniMax 300 成像细胞计数仪进行成像和计数。
提示：
由于 Jurkat 细胞圆形的形态和统一的大小，可轻松进行成像和计数。对于 StainFree 细胞计数，SoftMax Pro 软件中的预设的 “CellsC” 非常有效。
Jurkat 细胞分析工具包
- SpectraMax® i3x 多模式微孔板检测平台
- SpectraMax® MiniMax™ 300 成像细胞仪
- SoftMax® Pro 软件
分析类型：离散对象分析
识别对象所需波长：TL
关于 StainFree 细胞检测技术
细胞成像检测通常需要借助于荧光染料对细胞标记，但会对活细胞产生毒性，或者仅可用于固定的细胞中使用。用于分析细胞计数和细胞融合度的无标记方法可让研究者定量监测细胞增殖和健康状况，无需进行那些可能会影响细胞活力且耗时的工作流程。
具备 MiniMax 300 成像细胞仪的 SpectraMax i3 多功能微孔板平台采用较独特且StainFree 细胞检测技术，让您能够进行细胞增殖、毒性和其他测定，无需使用可与 DNA 相结合的细胞核染色，如 DAPI，或从长远来看确实会对细胞产生毒性的活细胞染料。