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Cell Painting 是一种基于高内涵多重图像检测的细胞学分析方法。在 Cell Painting 检测中,可使用 6 种以上荧光染料标记细胞的不同组分,包括细胞核、内质网、线粒体、细胞骨架、高尔基体和 RNA等。目的在于尽可能多地让细胞“着色”,从而获得整个细胞的代表性图像。自动图像分析软件可用于提取每个细胞的特征测量值。特征测量值的数量范围通常为每个细胞 100 至 1000 个。这些测量值通常包括强度、纹理、形状、大小以及某一研究对象与其邻近结构之间的距离,其中该距离可显示各种细胞器之间的空间关系。这些测量值共同构成了表型概况。
类器官是源于干细胞的三维 (3D) 多细胞微小组织,旨在贴切模拟人体器官(如肺、肝脏或脑)的复杂结构和功能。类器官是多细胞且展示出高度的自组装性,因此与传统的 2D 细胞培养物相比,能够更好地表现复杂的体内细胞应答和相互作用。有三种不同的定义可用于区分类器官:类器官是一种含多种细胞类型的 3D 生物学微小组织 类器官可表示组织的复杂性、组成和结构 类器官至少在某些方面与组织的功能类似
癌症涉及细胞的改变,包括使细胞脱离正常限制生长和分裂,从而侵袭和破坏相邻组织,并最终转移至身体远端部位。癌症研究人员需要更好的研究工具,使他们能够更容易地研究复杂的、未知的癌细胞与其环境之间的相互作用,并确定癌症治疗干预点。使用具有生物相关性的 3D 细胞模型,如可模拟肿瘤或器官体内环境的细胞球、类器官和器官芯片系统,了解我们的高内涵成像系统和分析软件解决方案,从而促进癌症研究。
了解更多有关我们的技术和解决方案如何能帮助支持您的 COVID-19 细胞反应和疫苗开发研究的信息。在此,我们介绍了感染性疾病研究中的常见应用,包括针对病毒中和及滴度的 ELISA 和细胞系开发。
活细胞成像是通过显微观察研究活细胞的细胞结构和功能的研究方法。它可以实时显示和定量细胞的动态变化过程。并且可以研究活体系统中的细胞和亚细胞结构、功能和组织,有助于开发在生物学上更加相关且能更好预测人体对新候选药物反应的测定方法。活细胞成像可应用在多种研究方向和生物应用 ——无论是对活细胞进行长期动力学监测,还是进行荧光标记检测。
开发适用于化合物筛选且更复杂、更具生物相关性和预测性的细胞测定法是药物发现领域的主要挑战。三维 (3D) 检测模型的综合性应用越来越普遍,推动了转化生物学的发展。更高复杂性的细胞模型已经得到普及,因为他们更好地模拟体内环境和对药物治疗的反应。具体而言,3D 细胞培养物具有接近再现人体组织各个方面的优势,这些方面包括结构、细胞组织、细胞间和细胞基质间的相互作用以及更具生理相关性的扩散特性。利用 3D 细胞测定法可增加研究和筛选活动的价值,跨越 2D 细胞培养物与整体动物模型之间的转化差距。通过复制体内环境的重要参数,3D 模型可提供有关干细胞行为以及体外组织发展的独到见解。
酶联免疫吸附实验 (ELISA) 是一种用来定量检测样本中某种抗原的方法。抗原是一种会导致动物免疫系统发起防御反应的毒素或其他外来物质,例如流感病毒或环境污染物。潜在抗原的范围很广,因此在许多研究和检测领域中使用 ELISA 来检测和定量各种样本类型中的抗原。使用 ELISA 分析细胞裂解物、血样、食品等特定物质。ELISA 有四种主要类型:直接法、间接法、竞争法和双抗夹心法。每种类型的描述如下,并用图说明了分析物和抗体是如何结合和使用的。直接法 ELISA 在直接法 ELISA 中,将抗原固定在微孔板孔的底部,然后再结合对该抗原有特异性的抗体,其中该抗体同时还偶联了能够进行检测的酶或其他分子。间接法 ELISA 在间接法 ELISA 中,将抗原固定在微孔板孔的底部,然后加入对该抗原有特异性的抗体。随后加入酶或其他检测分子的二抗结合一抗。竞争法 ELISA 在竞争法 ELISA 中,将参照抗原固定在微孔板孔的底部。将样品和抗体加入孔中,如果样品中存在抗原,则它会与参照抗原竞争结合抗体。洗掉没有结合的物质。样品中的抗原越多,最终孔底结合的参照抗原的抗体就越少,信号就越弱。夹心法 ELISA 对于夹心法 ELISA,使用对靶抗原上的两个不同表位具有特异性的两种抗体。捕获抗体结合到微孔板孔底,并结合该抗原的一个表位。检测抗体结合该抗原的不同表位,并偶联可进行检测的酶。(如果检测抗体未偶联,则需要酶偶联的检测二抗)。
神经突的生长是通过对神经元过程进行分类和定量来评估的。使用荧光显微镜可对这些神经元过程进行成像,并可在通量较低时通过手动追踪和计数来对这些神经元过程进行定量。但对于更高通量的微孔板形式的样品,搭配使用分析软件与自动化成像系统是一个更有效的解决方案。Molecular Devices 提供了多个不同的自动成像仪选项,以便实验室可以选择一个最适合他们研究的系统。继续阅读,了解如何使用 CellReporterXpress 软件更有效地采集和分析神经元细胞数据。
干细胞为研究人员提供了新的机会来发现和研究与疾病过程相关度更高的靶标和通路。提供更实际的模型以检测和确认新药物靶标,并生成药理学和毒理学数据,具备更强的临床应用转化性。此外,干细胞模型的应用为药物开发提供了个性化医疗的新途径,同时减少或甚至有可能取代动物试验。诱导型多能干细胞源性(iPSC 源性)细胞让研究人员能够研究原代细胞,而不会在获取此类细胞时遭遇传统限制。
准确定量多孔微孔板中细胞数量的能力使研究细胞健康或增殖的多种生物学应用成为可能。这些应用可利用终点测定法对经荧光染色的细胞核进行成像,或可要求对未经染色的活细胞或固定细胞进行可靠的透射光成像。在这两种情况下,通过软件细分对细胞进行计数应该是快速且可靠的。在此,我们探讨了通过细胞计数评估增殖、细胞毒性或融合度的各种方法和技术,这些方法和技术可通过明场或荧光成像并使用自动成像系统和分析软件快速完成。
膜片钳技术是一种用于了解离子通道行为的通用型电生理学工具。每个细胞都表达离子通道,但通过膜片钳技术进行研究的最常见细胞包括神经细胞、肌纤维、心肌细胞和高表达单一离子通道的卵母细胞。为了评估单个离子通道的传导性,微电极与细胞膜会形成高电阻封接,并移除包含目标离子通道的细胞膜片。或者,当微电极密封至细胞膜上时,此细胞膜片会破裂,从而使电极能够与整个细胞进行电学上的连通。之后施加电压,形成电压钳,并测量膜电流。电流钳也可用于测量细胞膜内外电压(称为膜电位)的变化。可以通过添加化合物阻断或激活通道来改变细胞膜内的电压或电流变化。这些技术使研究人员能够了解离子通道在正常和疾病状态下如何表现,以及不同的药物、离子或其他分析物如何改变这些状态。
稳定细胞株广泛用于许多重要的应用,包括生物制品(如重组蛋白和单克隆抗体)生产、药物筛选和基因功能研究。开发稳定细胞株的过程通常始于将所需的质粒转染至选定的宿主细胞,一般是 CHO 或 HEK 293 细胞。转染后,研究人员筛选和定量分析高表达的细胞克隆。一旦检测到这些高产细胞株,便进一步对这些细胞和其产生的蛋白质进行验证。传统上用于细胞株开发的人工筛选方法既费时又费力,因此对高通量自动化解决方案提出了巨大的需求。下面常规的工作流程有助于确定可以帮助您进行研究的系统。
从显示完整细胞的相差显微镜到单细胞或细胞器的荧光成像系统,研究人员在细胞成像方法上有多种选择。对细胞进行分析来评估和测定细胞当前的状态,例如细胞完整性、毒性和活性及各种其他研究应用。细胞分析的一个不可或缺的部分是数据收集、分析并导出为有意义且有用的格式。
约克大学使用 Axon 膜片钳仪器来研究泛连接蛋白通道在癫痫中的作用
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