细胞计数仪
细胞计数仪：HUVEC 细胞
人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 是从脐带静脉中分离出来的原代细胞。这种细胞是研究内皮细胞的模型系统，研究相关的低氧、炎症、氧化应激、感染反应以及正常和肿瘤相关血管生成等应用。TNF-α 和 IFN-γ 等细胞因子会诱导内皮细胞激活（一种炎性反应），并导致 VCAM-1/CD106 等细胞黏附分子上调，这些上调可使用荧光标记抗体和细胞成像进行定量。
图 1：StainFree 细胞计数
使用 SpectraMax i3 MiniMax 300 成像细胞计数器对 HUVEC 进行成像，并使用预定义的 “CellsB” 分析设置对透射光图像进行细胞识别。左图显示的是原始透射光图像，右图显示的是同一个图像，但有紫色标记，表明软件检测到的细胞。显示了高密度（上排）和低密度（下排）下接种的细胞。
图 2：StainFree 细胞计数 vs 荧光细胞核计数
按每孔 156 至 20,000 个细胞的密度范围接种的 HUVEC 使用 StainFree 技术进行计数（蓝色圆圈），或使用 EarlyTox™ 活细胞红色染料进行染色，并对红色荧光胞核进行计数（红色圆圈）。在整个细胞密度范围内，使用两种方法获得的细胞计数结果基本吻合。
图 3：HUVEC 中细胞因子诱导的 VCAM-1/CD106 表达
对经细胞因子 TNF-α 和 IFN-γ 处理的（左图）或未处理的（右图）的 HUVEC 使用 FITC 标记的抗 VCAM-1/CD106 抗体进行染色，并使用 SpectraMax MiniMax 300 成像细胞计数器进行成像。
图 4：抑制 HUVEC 中细胞因子诱导的 VCAM-1/CD106 表达
HUVEC 按 10,000 个细胞/孔的密度接种在 96 孔板中，并让其贴壁和生长过夜。用细胞因子 TNF-α 和 IFN-γ，以及不同浓度的 p38 MAP 激酶抑制剂 SB202190 处理 24 小时，然后用 FITC 标记的抗 VCAM-1/CD106 抗体进行染色。包括不含抑制剂或细胞因子的对照。
提示：
HUVEC 细胞具有典型的鹅卵石样外观。对于 StainFree 计数，SoftMax Pro 软件图像分析设置中的预定义的 “CellsB” 非常有效。或者，对因细胞因子等处理导致形态发生变化的细胞进行计数时，在细胞图像上绘制来创建一个新的分析设置可能会有帮助。
HUVEC 细胞分析工具包
- SpectraMax® i3 多功能微孔板检测平台
- SpectraMax® MiniMax™ 300 成像细胞仪
- SoftMax® Pro 软件
分析类型：离散对象分析
识别对象所需波长：TL
关于 StainFree 细胞检测技术
细胞成像检测通常需要借助于荧光染料对细胞标记，但会对活细胞产生毒性，或者仅可用于固定的细胞中使用。用于分析细胞计数和细胞融合度的无标记方法可让研究者定量监测细胞增殖和健康状况，无需进行那些可能会影响细胞活力且耗时的工作流程。
具备 MiniMax 300 成像细胞仪的 SpectraMax i3 多功能微孔板平台采用较独特且StainFree 细胞检测技术，让您能够进行细胞增殖、毒性和其他测定，无需使用可与 DNA 相结合的细胞核染色，如 DAPI，或从长远来看确实会对细胞产生毒性的活细胞染料。