细胞计数仪
应用细胞计数器：HeLa 细胞
HeLa 细胞是第一批在实验室中培育的细胞系，如今仍用于无数生物医学研究项目。这些细胞来自 1951 年 Henrietta Lacks 的宫颈癌细胞，Lacks 后来死于这种疾病。Rebecca Skloot 最畅销的书籍《永生的海拉》讲的是有关这位患者的生命和遗留标本的精彩故事。
图 1. 免染分析与荧光细胞计数的比较
使用 StainFree™ 细胞检测技术（蓝色圆圈）和红色胞核染色（红色圆圈）计数的 HeLa 细胞。采用两种方法得到的计数基本吻合，表明使用 StainFree 技术可获得准确的细胞计数，同时无需荧光染料（每个图中 r > 0.99）。
图 2. 使用 StainFree 覆盖区域分析得到的生长曲线
HeLa 细胞按 4 的初始密度接种到 96 孔板中：每孔 250 个（紫色）、500 个（蓝色）、1000 个（绿色）以及 2000 个（红色）细胞。细胞通过透射光 (TL) 通道进行成像 9 天。通过 StainFree 分析测定每个时间点处细胞所覆盖的区域百分比。
图 3. 使用 StainFree 技术测定细胞毒性
HeLa 细胞按每孔 1000 个细胞接种，并培育过夜。之后用 anisomycin（红色圆圈）或 trichostatin（绿色圆圈）处理 72 小时。通过 StainFree 分析计算所覆盖的区域百分比来测定细胞毒性。使用 SoftMax Pro 软件绘制 IC50 曲线。
图 4. 用有毒化合物处理的 HeLa 细胞的图像
顶排：HeLa 细胞用低（左）或高（右）浓度的 anisomycin 处理，并通过透射光 (TL) 通道进行成像。底排：HeLa 细胞用低（左）或高（右）浓度 staurosporine 处理，并使用 EarlyTox Cell Integrity Kit 检测细胞毒性。活细胞标记为红色，死细胞标记为红色和绿色。
提示 1：
为了在无染色的情况下对 HeLa 细胞进行计数，使用 SoftMax Pro 软件中的预定义设置“CellsA”，或使用该软件中的绘图工具创建一个新的设置。所使用的分析方法将取决于细胞的形态和生长条件。先尝试预定义设置，看看效果如何。
提示 2：
使用 SoftMax Pro 软件中的场分析功能可简化得到如此处所示的生长曲线的过程。场分析计算图像中细胞覆盖的区域百分比（融合度）。计算细胞融合度还有助于测定法开发。例如，您可以按照多个不同的密度检测细胞，并确定哪一个能产生理想的检测结果。
提示 3：
久而久之，检测细胞毒性就很容易了。仅分析在所需时间点细胞所覆盖的区域百分比，并使用 SoftMax Pro 软件绘制出结果图。无需染色或收获您的细胞。
HeLa 细胞分析工具包
- SpectraMax® i3 多功能微孔板检测平台
- SpectraMax® MiniMax™ 300 成像细胞计数仪
- SoftMax® Pro 软件
- EarlyTox™ 细胞完整性试剂盒
仪器设置
分析类型：离散对象分析
识别对象所需波长：TL
关于 StainFree 细胞检测技术
细胞成像检测通常需要借助于荧光染料对细胞标记，但会对活细胞产生毒性，或者仅可用于固定的细胞中使用。用于分析细胞计数和细胞融合度的无标记方法可让研究者定量监测细胞增殖和健康状况，无需进行那些可能会影响细胞活力且耗时的工作流程。
具备 MiniMax 300 成像细胞仪的 SpectraMax i3 多功能微孔板平台采用较独特且StainFree 细胞检测技术，让您能够进行细胞增殖、毒性和其他测定，无需使用可与 DNA 相结合的细胞核染色，如 DAPI，或从长远来看确实会对细胞产生毒性的活细胞染料。