使用神经突增生检测简化神经元的特性鉴定,以在体外研究神经元的发育和变性。
神经元通过延伸其称为轴突和树突的细胞体来建立连接,这通常被称为“神经突”或“神经突起”。此生物现象称为神经突增生,受复杂的胞内信号转导事件的调控。
神经突增生是体外研究神经元发育和神经元变性的常用检测。神经突的发展需要胞外和胞内信号的复杂相互作用。神经营养因子可以刺激或抑制神经突的生长。重要的是,神经元的发育会受到神经毒性化学物质的影响。
了解促进神经突增生的信号转导机制,可为解释神经毒性反应和化合物筛选数据以及解释影响神经发育和再生的因素提供宝贵见解。对神经突增生的抑制或刺激与中风、帕金森病、阿尔茨海默病和脊髓损伤等各种中枢神经系统 (CNS) 失调或损伤密切相关。
用于分析神经突增生的工作流程解决方案
神经突的生长是通过对神经元过程进行分类和定量来评估的。使用荧光显微镜可对这些神经元过程进行成像,并可在通量较低时通过手动追踪和计数来对这些神经元过程进行定量。但对于更高通量的微孔板形式的样品,搭配使用分析软件与自动化成像系统是一个更有效的解决方案。
工作流程说明了用于分析神经突增生的简化流程,并对可帮助您简化研究并提高通量的系统进行了重点介绍。
- 培养神经元细胞:在 96 孔或 384 孔微孔板中培养细胞,并让其形成神经轴突网络。
- 用化合物处理:随后将细胞暴露于有毒化合物 48 小时。
- 标记染色:化合物处理完成后,可直接向培养基添加活细胞染色剂。也可以在细胞固定后进行使用荧光偶联抗体的免疫染色实验步骤。
- 采集神经元图像:神经元的高内涵成像使科学家能够鉴定神经元网络(例如神经轴突数量、长度和分支)变化的特性并对此类变化进行测定,以及确定总体或特定的毒性反应。使用大视野光学器件采集图像,对于每个孔,都可以实现在更少的位置对更多细胞进行采样,从而大大加快板的采集时间。
- 分析神经元网络:高内涵分析提供了一种定量方法以确定阳性和阴性因子对神经轴突生长的影响。使用细胞成像分析软件对神经元细胞图像进行定量分析,以鉴定几个参数的特性,包括每个细胞的过程数、神经突增生的长度、分支和细胞数。
神经突增生应用和检测
神经元的高内涵成像使科学家能够鉴定神经元网络(例如神经突数量、长度和分支)变化的特性并对此类变化进行测定,以及确定总体或特定的毒性反应。
了解如何使用自动显微和高内涵分析软件迅速、准确地捕获和定量神经元活动: